病原菌分型定量检测引物探针组、试剂盒及样本纯化方法

    公开(公告)号:CN113564271B

    公开(公告)日:2021-12-17

    申请号:CN202111109849.9

    申请日:2021-09-22

    摘要: 本发明公开了一种病原微生物分型定量检测的引物探针组,包括细菌检测引物和检测探针,所述细菌检测引物包括21‑16S‑F3序列如SEQ ID No.1所示、21‑16S‑R3序列如SEQ ID No.2所示;所述细菌检测探针包括21‑16S‑G+probe3序列如SEQ ID No.3所示及21‑16S‑G‑probe3序列如SEQ ID No.4所示。本发明提供的试剂盒具有高敏感性、高特异性、高稳定性以及定量无需外标等优点,可精准的对样本中的病原菌进行分型和定量。本发明对样本进行预处理后的结果更为可靠,可精准显示活病原菌的感染情况,为临床感染的快速鉴别诊断、治疗监测提供依据。

    一种检测血浆中肝细胞来源外泌体的方法

    公开(公告)号:CN112147058A

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201910559220.0

    申请日:2019-06-26

    IPC分类号: G01N15/14 G01N1/28 G01N1/30

    摘要: 本发明对现有外泌体提取方法进行了改进,公开了一种从血浆中提取外泌体的方法,该外泌体提取方法操作简单、效率高、得到的外泌体得率高,纯度高,最重要的是可以保持外泌体完整的结构和生物功能。外泌体提取后,本发明选择识别效果最佳的肝细胞标志性蛋白ALB和外泌体标志性蛋白CD63搭配进行提取物标记,然后利用外泌体的Amnis量化成像分析流式细胞仪,利用最佳的检测参数可以对通过流动室中的每个细胞进行成像,实现了对细胞图像进行多参数量化分析,获得全新的细胞形态统计学数据,精确而灵敏地识别出了血浆中肝细胞来源的外泌体。本发明得到的肝细胞来源的外泌体表达谱可作为肝再生评估的的工具,具有巨大的发展潜力。

    实时定量PCR体外检测单碱基损伤修复试剂盒

    公开(公告)号:CN102181528B

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201110064338.X

    申请日:2011-03-17

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 一种实时定量PCR体外检测单碱基损伤修复试剂盒,所述试剂盒的组成如下:10X检测缓冲液、5X低盐细胞裂解液、2X细胞核蛋白或线粒体蛋白提取液、20X检测底物、2XqPCR损伤修复缓冲液,所述修复缓冲液包括taq酶、dNTP、探针和引物。本发明由于扩增内参和损伤碱基qPCR模板的引物相同,因此可由内参的量算出损伤碱基修复的量。由于互补模板仅有14个碱基与引物2互补,因此在qPCR过程中不能与引物2产生退火,保证了损伤修复检测的特异性。互补模板的3‘-末端为双脱氧寡核苷酸,防止了自身的延伸。检测损伤模板的探针和检测内参模板的探针标有不同的荧光基团,因此可在同一个qPCR体系中检测来实现损伤模板修复的绝对定量。

    基于PCR-CRISPR-Cas13a检测乙型肝炎病毒前基因组RNA的试剂盒

    公开(公告)号:CN114959110A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202110213143.0

    申请日:2021-02-25

    摘要: 本发明公开了一种基于PCR‑CRISPR‑Cas13a检测乙型肝炎病毒前基因组RNA的试剂盒。本发明提供了核酸分子组合物,由引物HR‑RT、引物F、引物R和特异crRNA组成;引物HR‑RT为SEQ ID No.1所示的单链DNA分子;引物F为SEQ ID No.2所示的单链DNA分子;引物R为SEQ ID No.3所示的单链DNA分子;特异crRNA为SEQ IDNo.4所示的单链RNA分子。本发明还保护一种检测乙型肝炎病毒的方法:(1)提取受试者血液样本的总RNA,采用引物HR‑RT进行逆转录,得到cDNA;(2)采用引物F和引物R组成的引物对进行PCR扩增;(3)采用特异crRNA进行基于CRISPR‑Cas13a系统的可视化检测。本发明具有非常重要的临床应用前景和开发价值。

    病原菌分型定量检测引物探针组、试剂盒及样本纯化方法

    公开(公告)号:CN113564271A

    公开(公告)日:2021-10-29

    申请号:CN202111109849.9

    申请日:2021-09-22

    摘要: 本发明公开了一种病原微生物分型定量检测的引物探针组,包括细菌检测引物和检测探针,所述细菌检测引物包括21‑16S‑F3序列如SEQ ID No.1所示、21‑16S‑R3序列如SEQ ID No.2所示;所述细菌检测探针包括21‑16S‑G+probe3序列如SEQ ID No.3所示及21‑16S‑G‑probe3序列如SEQ ID No.4所示。本发明提供的试剂盒具有高敏感性、高特异性、高稳定性以及定量无需外标等优点,可精准的对样本中的病原菌进行分型和定量。本发明对样本进行预处理后的结果更为可靠,可精准显示活病原菌的感染情况,为临床感染的快速鉴别诊断、治疗监测提供依据。