一种适用于宫颈组织microRNA实时荧光定量PCR研究的新内参分子的筛选方法

    公开(公告)号:CN101818202A

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN201010155872.7

    申请日:2010-04-26

    Abstract: 本发明公开了一种适用于宫颈组织microRNA实时荧光定量PCR研究的新内参分子的筛选方法;本发明采用的技术步骤为:利用MicroRNA芯片对人类MicroRNA探针进行筛选,选出在宫颈癌及宫颈正常组织表达恒定且表达丰度高的MicroRNA,作为候选的内参;分别选取正常宫颈上皮组织和癌变宫颈组织作为临床宫颈组织标本,用荧光定量PCR进行验证;运用geNorm software及NormFinder两个专用的内参分析软件进行数据分析,从而发现可适用于宫颈组织MicroRNA研究的内参分子,运用本发明方法筛选并证实的内参分子,可避免不同宫颈组织标本在RNA的产量、质量及逆转录效率上可能存在的差别,更好的对实时荧光定量PCR检测的数据进行校正和标准化,提高研究的准确性及可靠性。

    HPV58E6特异性兔单克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN104610448B

    公开(公告)日:2018-04-03

    申请号:CN201510054024.X

    申请日:2015-02-03

    Abstract: 本发明制备了HPV58‑E6特异性兔单克隆抗体,包括如下步骤:设计HPV58E6特异性多肽段,合成多肽段并交联到两种载体。将合成好的多肽抗原免疫新西兰大白兔,测定血清滴度,Western Blot检测抗体特异性,然后将脾细胞与融合伴侣细胞进行细胞融合培养后,取上清检测抗体滴度及特异性,筛选出特异度及效价最好的融合细胞,将融合细胞裂解提取RNA,做RT‑PCR,获得抗体重轻链cDNA,构建入pTT5质粒载体,将包含重轻链质粒共转染到HEK‑293‑6E细胞进行表达获得重组抗体,即为HPV58‑E6单克隆抗体。此抗体可用于Western Blot检测HPV58型癌基因E6的表达。

    一种宫颈癌动物模型的建立方法

    公开(公告)号:CN1686568A

    公开(公告)日:2005-10-26

    申请号:CN200510049487.3

    申请日:2005-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种宫颈癌动物模型的建立方法,该方法为在无免疫渗漏SCID鼠腹腔注射0.5ml细胞密度为8×107hu-PBL/ml的PBS,进行免疫重建,24小时后皮下接种左右腋窝和背部,共3点,每点接种0.2ml细胞密度为5×107SiHa细胞/ml的PBS。本发明在国内外首次成功建立了免疫重建荷人HPV16阳性宫颈癌SCID鼠模型;同时检测其生物学特性和主要免疫学指标,为进一步研究HPV16阳性的宫颈癌免疫治疗尤其是疫苗研究提供有价值的动物模型。

    人绒癌耐药细胞株
    20.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109943530A

    公开(公告)日:2019-06-28

    申请号:CN201910160970.0

    申请日:2019-03-04

    Abstract: 本发明涉及两种人绒癌多药耐药细胞株,其保藏编号为:CCTCC NO:C2018245或CCTCC NO:C2018246。本发明是选择人绒癌JAR、JEG3细胞株作为亲代细胞,从11uM逐步增加化疗药物甲氨蝶呤(MTX)至作用浓度88uM,建立JAR/MTX(CCTCC NO:C2018245)、JEG3/MTX(CCTCC NO:C2018246)耐药细胞株。JAR/MTX、JEG3/MTX能在88uM MTX中稳定生长、传代、复苏,对MTX的耐药指数各为791.50、1040.04,除对MTX耐药外,对VP-16、5-FU、Taxol、ACTD有交叉耐药。且耐药细胞株建株完成后撤药培养3个月及液氮冻存半年后复苏细胞复测其耐药性,两株耐药细胞株的耐药性均为原来的90%以上,耐药细胞株的耐药稳定性极好。

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