一种快速高效提取发酵液中活性抗菌物质HSAF的方法

    公开(公告)号:CN106946892B

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201710311929.X

    申请日:2017-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种快速高效提取发酵液中活性抗菌物质HSAF的方法,包括四个步骤:(1)发酵液酸化;(2)惰性物质破除乳化;(3)乙酸乙酯振荡萃取;(4)离心、吸取上清液提取HSAF。本发明中所添加的惰性物质能够有效地破除乳化问题,所采用的振荡处理使萃取反应时间缩短至1min,极大地提高了萃取速率。本发明最大能够使发酵液中HSAF一次萃取效率达到88.2%,比对照提高了1.83倍,而且操作方便、工艺简单,是国内外首次对HSAF这一具有巨大应用前景的产品提取工艺进行总结。

    一种防治梨树腐烂病的生物杀菌剂及其生产方法

    公开(公告)号:CN105961411B

    公开(公告)日:2018-05-11

    申请号:CN201610294430.8

    申请日:2016-05-03

    Abstract: 本发明公开了一种防治梨树腐烂病的生物杀菌剂,生物杀菌剂中的各组分的含量如下:杀菌活性物质粗提液 300~500 mL/L、羧甲基纤维素纳 20~40 g/L、芸苔素内酯 10~50 mg/L、甘油 50~150 mL/L、氮酮 10~40 mL/L、有机硅DC‑5211 0.3~1 mL/L,其余为水;其中杀菌活性物质粗提液中含有杀菌活性物质为HSAF,生物杀菌剂中HSAF的浓度为24~40mg/L;本发明生物杀菌剂可通过对刮治后的病疤进行药剂涂抹防治梨树腐烂病,且具有成膜效果好,渗透力强,药效期长,伤口愈合快,治愈率高,药养多效,安全实用;本发明能替代化学杀菌剂,减少梨树腐烂病防治过程中化学农药的施用。

    一种抗生素溶杆菌基因敲除系统及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN106399213A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610645565.4

    申请日:2016-08-09

    CPC classification number: C07K14/195 C12N15/74 C12N2800/101

    Abstract: 本发明公开了一种抗生素溶杆菌基因敲除系统及其构建方法和应用,属于微生物基因工程技术领域。本发明利用自杀质粒构建用于基因敲除的重组载体,将重组载体转入感受态细胞中,并在含庆大霉素抗性培养基上和含蔗糖培养基上分别进行一次交换子和二次交换子的筛选,再利用PCR进行突变体筛选获得基因敲除突变体。利用该敲除系统成功敲除抗生素溶杆菌OH13中的两个基因,证明该系统适用于抗生素溶杆菌的基因功能研究,为其小分子代谢产物生物合成、遗传调控和作用机制研究奠定了基础。

    一种防治梨树腐烂病的生物杀菌剂及其生产方法

    公开(公告)号:CN105961411A

    公开(公告)日:2016-09-28

    申请号:CN201610294430.8

    申请日:2016-05-03

    CPC classification number: A01N43/90 A01N43/22 C12P17/182 A01N2300/00

    Abstract: 本发明公开了一种防治梨树腐烂病的生物杀菌剂,生物杀菌剂中的各组分的含量如下:杀菌活性物质粗提液 300~500 mL/L、羧甲基纤维素纳 20~40 g/L、芸苔素内酯 10~50 mg/L、甘油 50~150 mL/L、氮酮 10~40 mL/L、有机硅DC‑5211 0.3~1 mL/L,其余为水;其中杀菌活性物质粗提液中含有杀菌活性物质为HSAF,生物杀菌剂中HSAF的浓度为24~40mg/L;本发明生物杀菌剂可通过对刮治后的病疤进行药剂涂抹防治梨树腐烂病,且具有成膜效果好,渗透力强,药效期长,伤口愈合快,治愈率高,药养多效,安全实用;本发明能替代化学杀菌剂,减少梨树腐烂病防治过程中化学农药的施用。

    一种响应面法优化产酶溶杆菌OH11生产活性抗菌物质HSAF的方法

    公开(公告)号:CN107119088A

    公开(公告)日:2017-09-01

    申请号:CN201710311693.X

    申请日:2017-05-05

    CPC classification number: C12P17/182

    Abstract: 本发明公开一种响应面法优化产酶溶杆菌OH11生产活性抗菌物质HSAF的方法:包括菌株活化;种子液的培养;发酵培养;发酵液中HSAF的提取与检测。其中发酵培养基配比为黄豆粉8.00g/L,葡萄糖7.89g/L,CaCl2 0.72g/L;装液量、培养温度和发酵周期分别为22%、26℃、58h;通过在HSAF提取过程中添加惰性物质消除乳化问题,从而对发酵液HSAF进行准确定量,最终能得到HSAF产量为440.26mg/L,是常规条件下(10%TSB,29.24mg/L)下的15倍。而且本发明采用的原料来源广泛、价格低廉,能够有效降低HSAF生产成本,能为今后HSAF产业化生产提供了重要的技术参数。

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