公开(公告)号：CN112080575A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010892496.3

申请日：2020-08-28

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  李晨龙 ,  贾思振 ,  张颖 ,  夏阳 ,  袁诗宇 ,  翟云菲

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  G16B40/00

Abstract: 本发明公开了一种引物对组合，本发明还公开了所述引物对组合在结缕草种质鉴别或品种鉴定或AFLP分子指纹图谱库的构建中的应用。本发明还公开了一种结缕草AFLP分子指纹图谱库的构建方法及其应用。本发明经过反复多次不懈的试验成功地筛选到能有效鉴别结缕草不同种质的选择性扩增引物及引物组合，高质量的DNA指纹图谱，不但具有扩增位点多、带型质量好、分辨率高、条带疏密合适及分布均匀，易精准地检测出样本的细微差异，从而为构建结缕草AFLP分子指纹图谱库奠定了技术基础；还通过提供的试剂方法8对引物组合等成功而有效的鉴别出90个不同种质结缕草，为今后结缕草种质鉴别、新品种登记、注册和产权保护等提供了科学依据。

公开(公告)号：CN109362571A

公开(公告)日：2019-02-22

申请号：CN201811541831.4

申请日：2018-12-17

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  周兴元 ,  韩鹏 ,  丁久玲 ,  郑凯 ,  刘南淸 ,  梁栋

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种通过沿阶草种子组培快繁种苗的方法，包括如下步骤：1）沿阶草种子采集的种类、时间及采后的低温预处理；2）种子的消毒灭菌；3）种子外植体的无菌萌发培养；4）外植体胚性愈伤组织的诱导培养；5）胚性愈伤组织的分化培养；6）种苗的胚状体快繁培养；7）壮苗生根培养；8）无菌苗的移栽。本发明具有操作简单，种子胚芽易形成胚性愈伤组织，进而通过转接在分化培养基上形成具有根茎叶的完整植株，形成的组培苗即可移栽成活转接到种苗胚状体快繁培养基上，经过胚状体增殖培养和胚状体分化快繁培养，就可在2个月内形成胚状体丛生芽或小植株，培养20天左右就形成具有根茎叶的健壮种苗，且极易移栽成活，成活率高达100%。

公开(公告)号：CN108243960A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810117564.1

申请日：2018-02-06

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  刘艳 ,  韩鹏 ,  胡德龙 ,  周兴元 ,  夏阳 ,  吴璇

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种体细胞胚诱导培养基，包括改良MS培养基、2～4mg/L 2,4‑D、0.2mg/L NAA、0.1 mg/L 6‑BA、40g/L蔗糖、0.7%琼脂，pH值为5.8~6.0。本发明还公开了胚状体增殖生长组合培养基和无种质基因型限制高频体胚再生培养基。本发明还公开该体细胞胚诱导培养基和上述组合培养基的应用。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

公开(公告)号：CN110547198B

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN201910903598.8

申请日：2019-09-23

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  李成龙 ,  韩鹏 ,  刘艳 ,  张颖 ,  夏阳 ,  张文博

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种通过种子组培快繁空气凤梨的方法，包括1）选择空气凤梨种荚采集的时间；2）种荚的消毒灭菌；3）种荚的处理和胚性愈伤组织的诱导：将步骤3）的胚性愈伤组织进行继代培养，得到胚性愈伤组织与胚状体；5）胚性愈伤组织的快繁分化培养；6）壮苗生根培养；7）无菌苗的炼苗移与栽。本发明的方法具有操作简单，种子胚芽易形成胚性愈伤组织，当转接到分化培养基上易形成大量丛生芽，经过丛生芽增殖培养和分化快繁培养，就可在短短的3‑4个月内源源不断地形成上百个大小不同的小芽苗或小植株，小植株只需在壮苗生根培养基中培养25天左右就可形成具有根茎叶的健壮种苗，种苗通过炼苗后移入室外极易成活，成活率高达100%。

公开(公告)号：CN108243960B

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN201810117564.1

申请日：2018-02-06

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  刘艳 ,  韩鹏 ,  胡德龙 ,  周兴元 ,  夏阳 ,  吴璇

IPC: C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种体细胞胚诱导培养基，包括改良MS培养基、2～4mg/L 2,4‑D、0.2mg/L NAA、0.1 mg/L 6‑BA、40g/L蔗糖、0.7%琼脂，pH值为5.8~6.0。本发明还公开了胚状体增殖生长组合培养基和无种质基因型限制高频体胚再生培养基。本发明还公开该体细胞胚诱导培养基和上述组合培养基的应用。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

公开(公告)号：CN112080496A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010891862.3

申请日：2020-08-28

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  李晨龙 ,  梁栋 ,  刘艳 ,  白玉梅 ,  夏阳 ,  袁诗宇 ,  翟云菲

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种引物对组合，本发明还公开了所述引物对组合在沿阶草种质鉴别或品种鉴定或AFLP分子指纹图谱库的构建中的应用。本发明还公开了一种沿阶草AFLP分子指纹图谱库的构建方法及其应用。本发明经过反复多次不懈的试验成功地筛选到能有效鉴别沿阶草不同种质的选择性扩增引物及引物组合，高质量的DNA指纹图谱，不但具有扩增位点多、带型质量好、分辨率高、条带疏密合适及分布均匀，易精准地检测出样本的细微差异，从而为构建沿阶草AFLP分子指纹图谱库奠定了技术基础；还通过提供的试剂方法九对引物组合等成功而有效的鉴别出30个不同种质沿阶草，为今后沿阶草种质鉴别、新品种登记、注册和产权保护等提供了科学依据。

公开(公告)号：CN110547196A

公开(公告)日：2019-12-10

申请号：CN201910903330.4

申请日：2019-09-23

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  李成龙 ,  韩鹏 ,  贾思振 ,  张文博 ,  张颖 ,  夏阳

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种通过叶组培快繁空气凤梨种苗的方法，包括如下步骤：1）空气凤梨叶外植体的采取；2）叶外植体的消毒灭菌；3）叶外植体丛生芽的诱导；4）芽苗的快繁分化培养；5）壮苗生根培养；7）无菌苗的炼苗移栽。本发明材料来源广泛，取材快捷方便，操作简单，繁殖系数高，种苗生长速度快，可在较短时间内快繁大量性状一致、生长一致且健壮的组培苗等优点，既解决了空气凤梨种子繁殖困难，后代有可能发生变异，不能保持母本优良性状的缺点，又解决了很多稀有种或品种只在花后才会产生稀少的子株，不能满足组培快繁全年采集外植体材料的现实问题。