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公开(公告)号：CN112301015A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011208395.6
申请日：2020-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶促进蛋白在枯草芽孢杆菌中胞外表达的方法，属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达，目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等，可实现胞内定位目标蛋白胞外表达，提高生产效率、简化后提取工艺，具有较高的学术意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN112301015B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202011208395.6
申请日：2020-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶促进蛋白在枯草芽孢杆菌中胞外表达的方法，属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达，目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等，可实现胞内定位目标蛋白胞外表达，提高生产效率、简化后提取工艺，具有较高的学术意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN113980936A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111224621.4
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了β‑半乳糖苷酶突变体及其在制备长链GOS中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑半乳糖苷酶突变体R333M、N467S，在目前条件下，制备低聚半乳糖长链多糖的产率分别为41.06％、44.16％，较野生型的33.47％分别提高了24.29％、33.55％，提升了低聚半乳糖的益生效果，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN113046284A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202110242462.4
申请日：2021-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑1,3‑葡萄糖苷酶在黑曲霉低聚糖制备中的应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明将来源于Thermoplasmaacidophilum的α‑1,3‑葡萄糖苷酶在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达，将所述α‑1,3‑葡萄糖苷酶TaAglA以10％葡萄糖和20％麦芽糖为底物，黑曲霉低聚糖产量最高能达到88.5g/L，转化率为29.5％。以10％麦芽糖和10％麦芽糊精为底物，黑曲霉低聚糖产量最高能达到47.4g/L，转化率为23.7％。本发明制备得到的黑曲霉低聚糖(NOS)产量远高于现有技术，并且能以较低浓度的底物进行转化，同样获得了较高的黑曲霉低聚糖(NOS)转化率和产量，有利于拓宽黑曲霉低聚糖的底物范围和降低生产成本。
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公开(公告)号：CN111607626A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010592371.9
申请日：2020-06-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精酶在制备麦芽七糖中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种重组枯草芽孢杆菌，该重组枯草芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌为宿主，表达热球菌Thermococcus sp.Strain B1001来源的环糊精酶。本发明通过将热球菌来源的CDase在食品准入的枯草芽孢杆菌中进行了重组表达，酶活为5.9U/mL，应用该重组CDase生产麦芽七糖，底物浓度80g/Lβ-环糊精，转化率高达82.33％。本发明的CDase在高底物浓度下的转化率和产物纯度高，可有效降低高纯度麦芽七糖的生产加工成本，具有很好的应用价值和商业开发意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111499688A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010290289.0
申请日：2020-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种信号肽及其在生产α-淀粉酶中的应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明提供了一种氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的信号肽AspB’，以枯草芽孢杆菌为宿主，将此信号肽与超高温α-淀粉酶进行共表达，可显著提升超高温α-淀粉酶的产量；将本发明的共表达了信号肽AspB’与超高温α-淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WS9/pHY300PLK-AspB’-pfa接种至发酵培养基中进行发酵，发酵60h，就可使发酵液中超高温α-淀粉酶的酶活高达119.01U/mL，在此基础上，对含菌体的发酵液进一步进行高温热处理，可有效提高发酵液中超高温α-淀粉酶的可溶性酶活。
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公开(公告)号：CN104531652A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410733876.7
申请日：2014-12-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C12P13/005 , C12Y401/01015
Abstract: 本发明公开了一种添加维生素B6提高谷氨酸脱羧酶产量的方法及应用，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明采用导入了L-谷氨酸脱羧酶GAD基因的重组大肠杆菌，以半合成培养基、分批补料的发酵方式控制一定的比生长速率，在OD600值为20-80时进行流加一定浓度乳糖进行诱导产酶，并在诱导过程中添加2-25mM维生素B6，诱导24h胞内谷氨酸脱羧酶酶活由对照(发酵过程中未添加维生素B6)1293U/mL提高到3300U/mL；本发明还公布了一种利用该发酵工艺的重组酶进行无需添加辅酶生产γ-氨基丁酸的合成工艺，GABA积累量由对照的190g/L增加到374g/L。
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公开(公告)号：CN113980936B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202111224621.4
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了β‑半乳糖苷酶突变体及其在制备长链GOS中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑半乳糖苷酶突变体R333M、N467S，在目前条件下，制备低聚半乳糖长链多糖的产率分别为41.60％、44.16％，较野生型分别提高了8.13％、11.14％，提升了低聚半乳糖的益生效果，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN114214304B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202111219626.8
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了GOS转化率提升的β‑半乳糖苷酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明中所使用的野生型β‑半乳糖苷酶已经具备良好的GOS合成能力，在此基础上，对其进行改造，得到的突变体在制备GOS的总转化率上相较于野生型有着一定的提升，其中突变体Y406F、R441K和Y563F的转化率分别为63.81％、64.27％以及63.58％，此转化率已属于行业内领先水平。同时，在本发明中，野生型生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖产率为23.33％，突变体Y406F和Y563F生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖的产率较野生型有进一步的提升。长链GOS产率也较野生型有了显著提升，增加了GOS的益生作用。
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公开(公告)号：CN114410605B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210090842.5
申请日：2020-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶突变体促进重组蛋白胞外表达的方法，属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达，目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等，可实现胞内定位目标蛋白胞外表达，提高生产效率、简化后提取工艺，具有较高的学术意义和应用价值。
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