公开(公告)号：CN111630379B

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN201780097812.4

申请日：2017-12-28

Applicant: 株式会社岛津制作所

Inventor： 岛田崇史 ,  岩本典子 ,  高梨惠

IPC: G01N30/06 ,  C12N11/14 ,  G01N1/28 ,  G01N27/62 ,  G01N27/626 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法，该方法包括以下步骤：(a)捕捉样品中的单克隆抗体并将其固定在多孔体的细孔内的步骤；(b)使固定有该单克隆抗体的多孔体与固定有蛋白酶的纳米颗粒接触，用30分钟以上进行单克隆抗体的选择性蛋白酶消化的步骤；以及(c)通过液相色谱质谱联用(LC‑MS)对由选择性蛋白酶消化得到的肽片段进行检测的步骤，在反应开始初期的10秒～5分钟的搅拌条件下以及之后的静置条件下实施步骤(b)。根据本发明，可以简化使用质谱分析的单克隆抗体的检测方法并在多样品分析中应用。

公开(公告)号：CN111512152B

公开(公告)日：2023-08-11

申请号：CN201780097953.6

申请日：2017-12-28

Applicant: 株式会社岛津制作所

Inventor： 岩本典子 ,  岛田崇史

IPC: G01N30/06 ,  C12N11/14 ,  G01N1/28 ,  G01N27/62 ,  G01N30/72 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法，所述方法包括以下的步骤：(a)捕捉样品中的单克隆抗体并固定化于多孔体的细孔内的步骤；(b)使固定化有该单克隆抗体的多孔体与固定化有蛋白酶的纳米颗粒接触而进行单克隆抗体的选择性蛋白酶解的步骤；及(c)通过液相色谱质谱分析(LC‑MS)来检测利用选择性蛋白酶解而得到的肽片段的步骤，在步骤(a)之后，还包括(a’)进行在酸性条件下的还原反应的步骤。根据本发明，可以期待使用了质谱分析的单克隆抗体的检测方法的进一步的应用。

公开(公告)号：CN111656190A

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN201880088090.0

申请日：2018-02-08

Applicant: 株式会社岛津制作所

Inventor： 岛田崇史 ,  岩本典子

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/549 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法，所述方法包括以下的步骤：(a)捕捉样品中的单克隆抗体并固定化于多孔体的细孔内的步骤；(b)使固定化有该单克隆抗体的多孔体与固定化有蛋白酶的纳米颗粒接触而进行单克隆抗体的选择性蛋白酶解的步骤；及(c)通过液相色谱质谱分析(LC-MS)来检测利用选择性蛋白酶解而得到的肽片段的步骤，其为在离液试剂和还原剂的存在下、在pH8～9的条件下实施步骤(b)的选择性蛋白酶解的方法。

公开(公告)号：CN105518447A

公开(公告)日：2016-04-20

申请号：CN201380078545.8

申请日：2013-09-09

Applicant: 株式会社岛津制作所

Inventor： 岛田崇史 ,  深尾典子 ,  青木智景 ,  佐藤孝明

IPC: G01N27/62 ,  G01N1/28

CPC classification number: G01N33/6857 ,  C07K1/107 ,  C07K1/12 ,  G01N1/405 ,  G01N33/6851 ,  G01N2333/976 ,  G01N2560/00

Abstract: 本发明涉及一种使用蛋白酶切断蛋白质从而制备肽片段的方法。本发明的方法具有如下步骤：使在细孔(29)内固定化有切断对象的基质蛋白(25)的多孔质体(20)与在表面固定化有蛋白酶(15)的微粒(10)在液体中接触。本发明中，前述微粒(10)的平均粒径大于前述多孔体(20)的平均孔径。根据本发明的方法，能够位置选择性地切断抗体的基质蛋白(25)。利用质谱法对通过上述方法得到的肽片段等进行分析，从而可以进行抗体的蛋白质的检测、定量分析。