肝素偶联琼脂糖微球在纯化细胞外囊泡中的应用

    公开(公告)号:CN117660290A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311548694.8

    申请日:2023-11-17

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了肝素偶联琼脂糖微球在纯化细胞外囊泡中的应用;所述肝素微球可特异性地结合并去除EV产物中残留的高峰度脂蛋白颗粒污染物,实测可降低产物总蛋白量的60.1%,且对其中的EV不产生负面影响,有效提高EV纯度。添加肝素微球的SEC柱还可同步实现EV的分离与纯化,将体液标本内包括脂蛋白在内的游离蛋白质截留,一步洗脱即可获得高纯度EV。本发明是一种简便的EV纯化/分离技术,作为纯化手段时,可与各种常规EV分离技术兼容,有效缓解血清等标本内丰度极高的脂蛋白颗粒对样品的污染;作为分离技术时,可摆脱专用大型设备的限制,在常规检验实验室等场所从各种生物体液样本中获取高纯度EV,便于推广与临床转化应用。

    完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104186460A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410387213.4

    申请日:2014-08-07

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法是在正常生长的细胞培养液中加入翻译延伸抑制剂,待翻译延伸抑制剂有效作用于RNC,抑制翻译延伸的进行后,将细胞冷却至0~4℃,再用预冷至0~4℃的PBS溶液清洗细胞以及加入细胞中,液氮中快速冷冻,超低温保存,于冰上解冻,再抽提RNC。本发明通过采用翻译延伸抑制剂有效固定核糖体,使之不易解离,将细胞内的翻译状况固定下来;再通过液氮急冻方法有效地冷冻保存RNC长期储存和运输,并且解冻后所提取的RNC与新鲜细胞提取的RNC无异,因此本发明突破了时间和空间的限制,为研究RNC及开展RNC商业服务提供了便利。

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