一种高通量快速测定稻米酶解量的方法

    公开(公告)号:CN111733210A

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN202010543579.1

    申请日:2020-06-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种高通量快速测定稻米酶解量的方法,至少包括如下步骤:(1)预处理:将米粉和乙酸钠缓冲液置于96孔深孔板中,预热后进行离心;所述米粉是指粉状稻米;(2)体外消化反应:使用多通道移液器将消化缓冲液加入到步骤(1)的96孔深孔板中,计时并搅拌,每隔一定时间进行取样,将样本置于96孔PCR板中,向96孔PCR板中加入酒精结束反应,获得各时间点的反应样本;(3)酶解量测定。本发明具有操作简单,成本较低,可快速高效地模拟米饭体内的消化情况,从而获得稻米体内的消化特性。

    基因表达载体Wxb-10T的构建、转基因水稻的制备及引物

    公开(公告)号:CN108949753B

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN201810836925.8

    申请日:2018-07-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基因表达载体Wxb‑10T的构建、转基因水稻的制备以及引物。引物见序列表SEQ ID NO.3‑8。以常规粳稻中Wxb等位基因为模板,构建了该等位基因第十外显子处单个核苷酸替换的水稻表达载体Wxb‑10T。该载体携带单碱基突变的全长Wxb等位基因序列,利用农杆菌介导的方法,获得了糯稻中转Wxb‑10T基因的转基因水稻。选育得到纯合系的转基因水稻,该类转基因水稻稻米直链淀粉含量普遍在12%左右,胶稠度和淀粉黏滞性指标与当下流行的优良食味软米接近。此方法通过在糯稻中导入对颗粒结合淀粉合成酶GBSSI编码基因Wx特定核苷酸定点修饰过的水稻表达载体得以实现。

    一种鉴别水稻GS5基因和GLW7基因类型的引物及其应用

    公开(公告)号:CN110894542A

    公开(公告)日:2020-03-20

    申请号:CN201911402905.0

    申请日:2019-12-31

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别GS5基因和GLW7基因类型的引物及其应用,属于水稻品种鉴定技术领域。本发明通过将水稻GS5基因和GLW7基因简的单重复序列转变为酶切分子标记来鉴别GS5基因和GLW7基因类型,其核苷酸序列如SEQ ID NO.:1~6所示。利用本发明的分子标记,可以准确鉴定GS5和GLW7基因的有利变异类型,加快育种筛选效率及进程;本发明设计的酶切分子标记扩增效果好,且所选酶是价格较低的常用酶,可极大降低鉴定成本,适用于大量品种基因型分析。

    一种基因表达载体、引物、构建方法及应用

    公开(公告)号:CN118638845A

    公开(公告)日:2024-09-13

    申请号:CN202410617990.7

    申请日:2024-05-17

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基因表达载体、引物、构建方法及应用,引物包括:第一引物对,用于扩增获得第一DNA片段,所述第一DNA片段是水稻Wxb基因的一段序列,包括其自身启动子;第二引物对,用于扩增获得第一搭桥片段;第三引物对,用于扩增获得第二搭桥片段;第四引物对,用于扩增第一搭桥片段和第二搭桥片段,获得第二DNA片段,所述第二DNA片段为包含Wxb第五外显子第52位碱基T突变为C的DNA序列。本发明基于已有等位基因功能位点和效应分析,采用人工定点突变的方式,在糯性水稻背景下实现了具有透明籽粒软米的创制,丰富了现有软米创制技术体系,为稻米外观和食味品质的协同改良提供了新的技术路线。

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