公开(公告)号：CN113621629B

公开(公告)日：2023-08-25

申请号：CN202110870360.7

申请日：2021-07-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  聂也森 ,  何妍之 ,  张智萍 ,  丁笠 ,  陈磊 ,  廖凯 ,  赵晨宏

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12P17/06

Abstract: 本发明设计一种基于丙二酰辅酶A再生的柚皮素体外酶促合成方法，在构建乙酰辅酶A合成酶ACS基因与乙酰辅酶A羧化酶ACC1基因的重组表达质粒的基础上，将重组质粒分别转化大肠杆菌和酵母细胞，表达目的蛋白，并将纯化的ACS与ACC1重组蛋白加入柚皮素体外酶促合成体系中，实现了丙二酰辅酶A的再生，以及以4‑香豆酸为底物在体外低成本酶促合成柚皮素。本发明设计了一个新的反应体系，无需添加昂贵的丙二酰辅酶A便能对其进行再生利用，并最终生成柚皮素。

公开(公告)号：CN113528471B

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202110817915.1

申请日：2021-07-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  何妍之 ,  聂也森 ,  张智萍 ,  丁笠 ,  陈磊 ,  廖凯 ,  赵晨宏

IPC: C12N9/00 ,  C12N9/90 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P17/06

公开(公告)号：CN111394352A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010211699.1

申请日：2020-03-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  张杰 ,  丁笠 ,  陈磊 ,  张智萍 ,  刘雅娴 ,  聂也森 ,  何妍之

IPC: C12N15/113 ,  A61K31/713 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明提出了一种PDCD11-shRNA，为根据核仁蛋白PDCD11的基因序列设计的针对PDCD11的shRNA分子，能够显著抑制人结直肠癌细胞HCT116的生长。本发明PDCD11-shRNA的序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的优点是能显著降低HCT116肿瘤细胞内PDCD11的表达水平，显著抑制细胞的增殖速率。因此，本发明设计的shPDCD11分子具有治疗结直肠癌的潜能。

公开(公告)号：CN105463044A

公开(公告)日：2016-04-06

申请号：CN201610029307.3

申请日：2016-01-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  陈金川 ,  张智萍 ,  金英善 ,  丁笠

IPC: C12P19/60

CPC classification number: C12P19/60

Abstract: 本发明提供了一种酶促合成紫云英苷的方法，步骤如下：(1)克隆、表达和纯化紫云英苷在合成途经中所需关键酶：包括糖原磷酸化酶GP、葡萄糖焦磷酸化酶GalU、黄烷酮-3-羟化酶F3H、黄烷酮合酶FLS1和类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶UGT78K2；(2)肌糖原Gn在GP作用下合成葡萄糖-1-磷酸G-1-P；(3)G-1-P在GalU作用下合成尿苷二磷酸葡萄糖UDPG；(4)柚皮素NRN在F3H作用下合成二氢山奈酚DHK；(5)DHK在FLS1作用下合成山奈酚KMF；(6)KMF和UDPG在UGT78K2作用下合成紫云英苷。本发明步骤少、操作条件温和、副产物少、得率高、无污染、生产成本显著降低。

公开(公告)号：CN113621629A

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN202110870360.7

申请日：2021-07-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  聂也森 ,  何妍之 ,  张智萍 ,  丁笠 ,  陈磊 ,  廖凯 ,  赵晨宏

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/61 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12P17/06

Abstract: 本发明设计一种基于丙二酰辅酶A再生的柚皮素体外酶促合成方法，在构建乙酰辅酶A合成酶ACS基因与乙酰辅酶A羧化酶ACC1基因的重组表达质粒的基础上，将重组质粒分别转化大肠杆菌和酵母细胞，表达目的蛋白，并将纯化的ACS与ACC1重组蛋白加入柚皮素体外酶促合成体系中，实现了丙二酰辅酶A的再生，以及以4‑香豆酸为底物在体外低成本酶促合成柚皮素。本发明设计了一个新的反应体系，无需添加昂贵的丙二酰辅酶A便能对其进行再生利用，并最终生成柚皮素。

公开(公告)号：CN107880134B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN201711126059.5

申请日：2017-11-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  张智萍 ,  何妍之 ,  黄岳 ,  陈磊 ,  丁笠 ,  刘雅娴

IPC: C07K19/00 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P17/06

Abstract: 本发明公开了一种酶促合成山奈酚的方法，其中涉及两种融合蛋白TrxA‑His‑F3H、TrxA‑His‑FLS1的制备及酶活性检测，并设计缓冲液体系，反应缓冲液为0.1 M Tris‑HCl（pH7.2），100μL反应体系中含有0.4%抗坏血酸、10%甘油、8.2 mMα‑酮戊二酸、0.01 mM硫酸亚铁、0.5 mM柚皮素、3.3μg TrxA‑His‑F3H、1.8μg TrxA‑His‑FLS1；并通过优化反应体系pH值、反应时间和温度，在体外建立一步高效合成山奈酚的方法。CCK‑8法检测合成的山奈酚对肿瘤细胞生长的抑制作用。

公开(公告)号：CN107858351A

公开(公告)日：2018-03-30

申请号：CN201711057180.7

申请日：2017-11-01

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  丁笠 ,  张智萍 ,  韦治明 ,  王小燕 ,  孙若男 ,  张杰 ,  陈志强

IPC: C12N15/113 ,  A61K48/00 ,  A61K31/713 ,  A61P35/00

CPC classification number: C12N15/113 ,  C12N2310/14

Abstract: 本发明提供了一种双链siRNA在制备恶性肿瘤的药物中的应用。针对新核仁蛋白Rsl1d1的核苷酸序列设计合成siRNA，利用该分子干扰治疗靶点的表达，从而影响其功能，然后给肿瘤模型施用常用抗肿瘤药物，通过测量肿瘤体积和小鼠体重的变化，发现siRNA转入HCT116结直肠癌细胞及其实体瘤后能显著抑制其生长。