公开(公告)号：CN104263859A

公开(公告)日：2015-01-07

申请号：CN201410562024.6

申请日：2014-10-20

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 李俊 ,  王金宝 ,  时建立 ,  徐绍建 ,  彭喆 ,  丛晓燕 ,  黄保华 ,  吴晓燕 ,  刘畅

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q2600/112 ,  C12Q2600/16

Abstract: 本发明专利涉及农业技术领域内的诊断技术。通过自行设计特异性引物L1、L2、L3，提取病毒DNA，在此基础上利用PCR方法鉴别检测猪圆环病毒不同血清型，扩增猪圆环病毒II型(PCV2)预计扩增片段大小为404bp，扩增猪圆环病毒I型(PCV1)预计扩增片断大小为198bp。并在此基础上研制成功了专用试剂盒，与现有技术相比该诊断方法和专用试剂盒具有很强的特异性、敏感性，与病毒分离和IFA等方法相比符合率可达90％以上。该引物对猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒的扩增结果均为阴性，可广泛用于临床和实验室圆环病毒的检测。

公开(公告)号：CN101236205A

公开(公告)日：2008-08-06

申请号：CN200810014057.1

申请日：2008-01-23

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 王金宝 ,  张祯涛 ,  李俊 ,  任慧英 ,  吴家强 ,  张秀美 ,  丛晓燕 ,  温建新 ,  周顺

IPC: G01N33/569

Abstract: 本发明提供一种欧、美型猪繁殖与综合症病毒抗体鉴别诊断试剂盒的制备方法，该方法是针对PRRSV VR－2332株的ORF7基因中欧、美型毒株的保守表位25aa～30aa，37aa～52aa及50aa～66aa的基因缺失，构建针对美洲型PRRSV N蛋白的原核表达载体pGEX－6P－1－N；针对欧洲型PRRSV N蛋白表位2aa～12aa、40aa～46aa及67aa～128aa的氨基酸序列，建立针对欧洲型PRRSV N蛋白的原核重组表达载体PQE30－N，重组质粒在大肠杆菌中成功表达，利用表达纯化的北美洲型N蛋白，制备用于PRRS抗体检测的间接ELISA诊断试剂盒，该抗体试剂盒与IDEXX试剂盒的符合率均可达到90％，以纯化的欧洲型蛋白作为包被抗原，优化了欧洲型PRRSV抗体检测间接ELISA方法，为PRRS抗体分型检测打下基础。

公开(公告)号：CN115125250B

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202210640527.5

申请日：2022-06-07

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 齐静 ,  姜丹丹 ,  杜以军 ,  吴香菊 ,  隋超 ,  李均同 ,  丛晓燕

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及基因敲除质粒和细胞系，此细胞系感染PRV后，产生的IFN‑β mRNA水平，相比于PAM‑KNU细胞显著降低；此外，本细胞系促进PRV增殖，可以用于增殖PRV和PRV疫苗生产。

公开(公告)号：CN116904508A

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202310547746.3

申请日：2023-05-16

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 杜以军 ,  姜丹丹 ,  齐静 ,  吴香菊 ,  李均同 ,  丛晓燕

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/12 ,  A61K38/17 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，一种序列表中序列1中的核苷酸序列或猪NONO蛋白真核表达载体，在制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖药物中的应用。本发明构建的真核表达载体可以显著高表达sNONO蛋白，显著抑制PRRSV增殖，能够应用于sNONO抗病毒作用的研究。

公开(公告)号：CN104830988B

公开(公告)日：2017-08-29

申请号：CN201510268125.7

申请日：2015-05-22

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 黄保华 ,  李俊 ,  时建立 ,  彭喆 ,  王莉莉 ,  朱晓琳 ,  郭立辉 ,  丛晓燕 ,  吴晓燕 ,  刘畅 ,  徐绍建

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 一种特异性检测鼠伤寒沙门氏菌的LAMP引物、试剂盒，以及利用LAMP引物和试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌的LAMP方法，所述LAMP引物及检测方法针对鼠伤寒沙门氏菌限制酶II基因的片段。所述LAMP方法特异性好、灵敏度高、检测要求的设备条件低、结果直观、肉眼可视，能够快速准确的鉴定兽医临床样本中的鼠伤寒沙门氏菌感染。

公开(公告)号：CN105969754A

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201610280953.7

申请日：2016-04-29

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 ,  济南海之华饲料有限公司

Inventor： 丛晓燕 ,  王黎文 ,  李桂华 ,  赵学峰 ,  田伟 ,  位宾 ,  杜以军 ,  陈蕾 ,  孙文博 ,  时建立 ,  王金宝 ,  谷立川

IPC: C12N9/88 ,  C12P19/36 ,  C12P19/32

CPC classification number: C12N9/88 ,  C12P19/32 ,  C12P19/36 ,  C12Y406/01001 ,  C12Y406/01002

Abstract: 本发明涉及基因工程与生物化学技术领域,具体涉及一种来源于霍乱弧菌的经过改造的二核苷酸环化酶，基因碱基序列如序列表中序列1所示。一种改造的核苷酸环化酶，氨基酸序列如序列表中序列2所示。改造的核苷酸环化酶基因或改造的核苷酸环化酶或载体或质粒在合成c‑di‑GMP、c‑di‑AMP中的应用。改造后的核苷酸环化酶，PET22b‑VC0179‑ΔLOOP比PET22b‑VC0179蛋白在酶的活性和产物生成效率方面都有很大的提高。提高GTP、ATP的利用率，减少酶的损耗，很大程度上降低了小分子的生产成本。酶的活性均有很大改善。而且纯化后的酶纯度较高，酶促反应效率很高，具有很好的开发应用价值。

公开(公告)号：CN102813922B

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201210332409.4

申请日：2012-09-11

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 王金宝 ,  杜以军 ,  齐静 ,  吴家强 ,  李俊 ,  黄保华 ,  丛晓燕 ,  任素芳 ,  孙文博 ,  时建立 ,  郭立辉 ,  吕伟

IPC: A61K39/39 ,  A61K39/12 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及疫苗佐剂技术领域，特别涉及一种复方油佐剂，由白油、油醇聚氧乙烯醚和聚氧乙烯醚硬脂酸酯三种成分组成。白油占80%-95%，油醇聚氧乙烯醚占1%-10%，聚氧乙烯醚硬脂酸酯占1%-10%。油醇聚氧乙烯醚分子量为400-600，聚氧乙烯醚硬脂酸酯分子量为400-600。分别称取处方量的白油、油醇聚氧乙烯醚和聚氧乙烯醚硬脂酸酯，均匀混合而成。复方油佐剂在制备动物疫苗中的应用。本发明成功解决了W/O/W型乳剂疫苗制备困难的难题，所制备的乳剂疫苗既便于注射又具有良好的免疫原性，而且稳定性比ISA206所制各的W/O/W型乳剂疫苗更好。

公开(公告)号：CN102851249B

公开(公告)日：2013-11-13

申请号：CN201210347876.4

申请日：2012-09-19

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 吴家强 ,  张玉玉 ,  李俊 ,  于江 ,  杜以军 ,  丛晓燕 ,  王大鹏 ,  王金宝

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/102 ,  A61P31/04 ,  C12R1/21

Abstract: 本发明涉及兽医生物制品中副猪嗜血杆菌疫苗领域，特别涉及一种副猪嗜血杆菌LZ-20100109株，其保藏编号为CGMCC No.5802。所述的副猪嗜血杆菌LZ-20100109株在制备副猪嗜血杆菌灭活疫苗中的应用。副猪嗜血杆菌LZ-20100109株对猪有较强的致病性，且具有良好的免疫原性，应用其制备的灭活铝胶疫苗安全可靠，不仅能提供同源攻毒保护，还可为血清1型、2型、4型、12型、14型和15型HPS等异源攻毒提供一定的交叉保护，接种猪群的发病率和死亡率均明显减少，能够有效预防副猪嗜血杆菌病的流行和传播，降低本病造成的经济损失，有着广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102335440B

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201110301214.9

申请日：2011-10-09

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 李俊 ,  王金宝 ,  时建立 ,  吴家强 ,  程凯慧 ,  徐绍建 ,  丛晓燕

IPC: A61K48/00 ,  A61K39/39 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明为两种含有14个CpG-ODN重复基序及18个CpG-ODN重复基序和表达猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因的核酸疫苗。本发明是为了提高猪圆环病毒2型(PCV2)基因免疫的效果，构建含14个及18个CpG基序和PCV2-ORF2的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF2。经酶切鉴定和序列测定，将重组质粒转染PK-15细胞，经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF2可表达PCV2Cap蛋白。该核酸疫苗中插入了具有免疫增强作用的CpG-ODN重复基序，可增强核酸疫苗的免疫效果，该核酸疫苗可在动物体内持续不断的产生Cap蛋白，使机体不断产生抗体，对猪体提供持久的免疫保护力，在PCV2的防控中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102851249A

公开(公告)日：2013-01-02

申请号：CN201210347876.4

申请日：2012-09-19

Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 吴家强 ,  张玉玉 ,  李俊 ,  于江 ,  杜以军 ,  丛晓燕 ,  王大鹏 ,  王金宝

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/102 ,  A61P31/04 ,  C12R1/21

Abstract: 本发明涉及兽医生物制品中副猪嗜血杆菌疫苗领域，特别涉及一种副猪嗜血杆菌LZ-20100109株，其保藏编号为CGMCCNo.5802。所述的副猪嗜血杆菌LZ-20100109株在制备副猪嗜血杆菌灭活疫苗中的应用。副猪嗜血杆菌LZ-20100109株对猪有较强的致病性，且具有良好的免疫原性，应用其制备的灭活铝胶疫苗安全可靠，不仅能提供同源攻毒保护，还可为血清1型、2型、4型、12型、14型和15型HPS等异源攻毒提供一定的交叉保护，接种猪群的发病率和死亡率均明显减少，能够有效预防副猪嗜血杆菌病的流行和传播，降低本病造成的经济损失，有着广阔的应用前景。