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公开(公告)号:CN102094021B
公开(公告)日:2012-12-12
申请号:CN201010587043.6
申请日:2010-12-14
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种玉米愈伤组织特异性启动子及其克隆方法与应用。本发明利用生物信息学分析获得一个WRKY基因,通过与基因组进行序列比较,设计引物进行PCR获得该基因5′上有的启动子区域,该启动子长2880bp,具有序列表中 1项下的序列,通过对启动子的分析,其含有多个顺式作用元件,把该启动子亚克隆到含GUS基因载体,启动GUS基因表达,把载体转化到水稻中去,对水稻的各个组织进行染色检测,发现该启动子特异性的在愈伤组织中表达,该启动子在基因工程以及基因功能研究中具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN102703450A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210163590.0
申请日:2012-05-24
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了玉米WUS1基因启动子,其具有如SEQIDNO.3所示的序列构成的核苷酸序列或与SEQIDNO.3所示的序列互补的核苷酸序列;本发明还提供了含有所述启动子的载体和宿主细胞;本发明还公开了所述启动子的用途。其优点在于:克隆得到了WUS1基因启动子,并证明该启动子能启动目的基因在水稻的根、托叶、叶和茎中表达,与转化pCAMBIA1301载体的阳性对照比较表明,该启动子驱动目的基因表达的效率与(CaMV)35S启动子相当,是一种新的可用于植物基因工程的来源于植物的启动子,生物安全性强;同时,该启动子的克隆对于玉米发育机制的研究具备重要的参考价值。
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公开(公告)号:CN102268443A
公开(公告)日:2011-12-07
申请号:CN201110208640.8
申请日:2011-07-25
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种玉米WRKY基因在提高植物耐逆性能上的应用。该玉米WRKY基因的氨基酸序列为序列表中的SEQIDN0:1,将序列表中的SEQIDN0:1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且具有植物WRKY转录因子功能。本发明的玉米WRKY转录因子的过表达转基因株系的T1代植株耐逆性实验表明,在逆境下转基因存活率基本在60%以上,说明本发明玉米WRKY基因可显著提高转基因株系对低温、高盐和干旱胁迫的耐受性。本发明的蛋白及其编码基因对于植物耐逆机制的研究,以及提高植物的耐逆性及相关形状的改良具有重要的理论及实际意义,将在植物的耐逆基因工程改良中发挥重要作用,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN102010864A
公开(公告)日:2011-04-13
申请号:CN201010586863.3
申请日:2010-12-14
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种玉米花粉组织特异性启动子及其表达载体,该启动子长2222bp,具有序列表中 1项下的序列,将其取代植物表达载体pCAMBIA1301上的CaMV35S启动子,构建成为一个新的植物表达载体,命名为p-ZMP5。本发明所提供的启动子的获得,为利用基因工程获得植物雄性不育系和恢复系创造了条件,为基因工程研究提供了依据,为外源基因在花粉中特异性表达提供了基础,外源基因可以是编码杀昆虫毒素(靶向以花粉为食的昆虫)的基因、可增强或修饰花粉的营养价值的基因等。此外,通过RNAi干扰PAB5基因,防止花粉的产生可以应用到行道树,对花粉过敏症有一定的缓解作用等,具有重要的理论和实践意义。
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公开(公告)号:CN101519660B
公开(公告)日:2011-04-13
申请号:CN200910029257.9
申请日:2009-04-03
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种生物技术领域的利用RNA干涉提高水稻中直链淀粉的含量的方法。本发明从水稻中克隆淀粉分支酶RBE3基因片段作为RNA干扰片段,以胚乳特异性启动子启动表达,构建了RBE3基因的siRNA表达载体,利用农杆菌介导的方法,获得了干涉RBE3基因的转基因水稻。RT-PCR和Southern杂交检验目的基因的整合和表达情况,对转基因水稻植株胚乳直链淀粉含量碘显色法测定表明,转基因植株直链淀粉含量较非转基因株平均提高幅度为140%,最高达到238%,筛选后获得籽粒直链淀粉含量显著提高的转基因水稻植株。从而提供了一种提高水稻中直链淀粉含量的方法,为利用转基因水稻大规模生产直链淀粉奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101974549A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010270483.9
申请日:2010-09-02
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/113 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法。RT-PCR分别扩增玉米矮花叶病毒及粗缩病毒外壳蛋白基因特异性片段,构建反向重复表达载体,利用中间载体分别将玉米矮花叶病毒外壳蛋白及粗缩病毒外壳蛋白两个反向重复片段串联在一起;将含双T的真核表达载体酶切,连入Ubiquitin启动子及Nos终止子,再将串联重复片段连入载体中,构建成兼抗玉米矮花叶病毒及粗缩病毒的无选择标记siRNA复合表达载体。本发明能够在转化后代中通过自交分离获得剔除选择标记的双抗性植株。本发明对开展抗病毒RNA干扰调控技术研究,创建高抗病毒玉米新种质具有重要的理论和实践意义。
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公开(公告)号:CN1623370A
公开(公告)日:2005-06-08
申请号:CN200410065610.6
申请日:2004-11-08
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01H1/00
Abstract: 转基因改良禾谷类作物籽粒淀粉品质的方法,其特征是分别构建淀粉分支酶基因和参与植物糖酵解及TCA循环的一个或多个代谢酶的基因RNA干涉表达载体,通过农杆菌介导或者基因枪转化把目的干涉片段整合到植物基因组中,特异性地抑制植物淀粉分支酶和参与植物糖酵解及TCA循环的一个或多个代谢酶的基因活性,从而提高作物籽粒淀粉中直链淀粉的比例和籽粒总淀粉的含量。采用本方法可以方便、有效地改良禾谷类作物籽粒淀粉品质。
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公开(公告)号:CN102703471B
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201210169735.8
申请日:2012-05-29
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供一种分离的多核苷酸,所述的多核苷酸选自下列中的一种:a)由部分或全部SEQ?ID?NO.7所示的序列构成的核苷酸序列;或b)与a)中所限定的核苷酸序列互补的核苷酸序列。本发明还提供上述多核苷酸在增加或减少植物体内水杨酸含量、降低或提高植物对病原物敏感性中的应用,并提供了有效的RNAi载体,证实了玉米基因NPR1在增强玉米抗病性中的作用,为提高玉米对病原物抵抗能力提供了一种新方法,同时可获得玉米基因NPR1沉默的模式植物,对于研究玉米的广谱抗病性有着非常积极的意义。
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公开(公告)号:CN102787116B
公开(公告)日:2013-10-02
申请号:CN201210063967.5
申请日:2012-03-12
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明涉及一种玉米愈伤组织特异性启动子,及其用于构建表达载体的用途。该启动子能在水稻愈伤组织中特异性表达。本发明是从玉米B73自交系中克隆出的一段长为1910bp启动子序列,序列如序列表中SEQIDNO:1。本发明的启动子只在愈伤组织中表达,使得目的基因的表达产物在一定空间积累,增加愈伤部位的表达量,在定向改良玉米品质上具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN102628052B
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201210119232.X
申请日:2012-04-23
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于水稻基因工程技术领域的利用广谱抗病相关基因OsMOS提高水稻抗病性能的方法。本发明从水稻日本晴中克隆出OsMOS基因全长cDNA,连接到植物载体中,以组成型启动子CaMV35S启动基因的表达,构建OsMOS基因的过表达。利用农杆菌介导的水稻遗传转化,获得转基因植株。通过多重PCR检测筛选标记基因潮霉素及目的基因OsMOS,并对转基因水稻的体内自由态水杨酸(FreeSA)进行测定,白叶枯病抗性接种鉴定。结果表明OsMOS过表达转基因植株FreeSA的含量明显高于对照植株,对白叶枯病具有更高的抗病性。从而提供了一种获得水稻广谱抗病性植株品系的方法。
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