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公开(公告)号:CN113046475A
公开(公告)日:2021-06-29
申请号:CN202110049558.9
申请日:2021-01-14
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种快速检测突变型新型冠状病毒的引物组合物及试剂盒,该引物组合物包括针对P681H突变位点的引物组合物和/或针对Y144del突变位点的引物组合物,针对P681H突变位点的引物组合物包括序列如SEQ ID NO:8所示的PNA探针和选自包括序列如SEQ ID NO:2~7的组合物、包括序列如SEQID NO:10、14~18的组合物中的一组或者两组引物组;针对Y144del突变位点的引物组合物包括序列如SEQ ID NO:20~24的引物和序列如SEQ ID NO:25的PNA探针。本发明基于LAMP技术提供了一种快速检测B.1.1.7新型冠状病毒突变株的引物组合物及试剂盒,特异性好、灵敏度高,无需复杂、昂贵的辅助设备,在30‑60min内即可实现核酸分子标志物的快速检测,检测结果可以通过目视法直接判断,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111057798A
公开(公告)日:2020-04-24
申请号:CN202010067653.7
申请日:2020-01-20
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测新型冠状病毒的LAMP引物组合和试剂盒,该引物组合选自如SEQ ID NO:3~SEQ ID NO:6所示的引物组1、如SEQ ID NO:7~SEQ ID NO:10所示的引物组2、如SEQ ID NO:11~SEQ ID NO:14所示的引物组3、如SEQ ID NO:15~SEQ ID NO:18所示的引物组4、如SEQ ID NO:19~SEQ ID NO:22所示的引物组5、如SEQ ID NO:24~SEQ ID NO:27所示的引物组6、如SEQ ID NO:28~SEQ ID NO:31所示的引物组7、如SEQ ID NO:32~SEQ ID NO:35所示的引物组8中的任一种或几种。本发明将上述引物组合与LAMP技术结合,不但可以通过肉眼观察到检测结果,无需复杂的辅助设备,简单易用,而且可通过荧光染料法实现检测结果半定量,检测灵敏度高,为该新型冠状病毒相关疾病的诊断以及治疗药物的研究提供了便利而快速的手段。
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公开(公告)号:CN107841536A
公开(公告)日:2018-03-27
申请号:CN201711002034.4
申请日:2017-10-24
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6886 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q1/6886 , C12Q2600/156 , C12Q2531/119 , C12Q2525/107 , C12Q2525/307
Abstract: 本发明涉及一种检测JAK2 V617F基因突变的引物组合物,其含有SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:6所示序列的引物和SEQ ID NO:7所示序列的PNA探针;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到1%,与探针法实时PCR的效果相当,且其可对JAK2 V617F基因突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高,有助于将来POCT(床旁检测)的实现。
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公开(公告)号:CN107164474A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710364251.1
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
Abstract: 本发明涉及一种用于检测CALR基因2型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因2型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到3%,几乎与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因2型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN104312913B
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201410554594.0
申请日:2014-10-17
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明提供了一种整合全血核酸提取、扩增即可视化检测肿瘤基因突变的微流控芯片、以及用所述微流控芯片进行基因突变检测的方法。所述微流控芯片包括细胞裂解室和细胞液滤过单元,所述细胞液滤过单元的下游连通至基因扩增及检测池;所述上游和下游之间设有过滤器。本发明无需对全血中的核酸进行提取,将全血稀释后直接加入到芯片中,通过加热裂解法在芯片上提取DNA,进行扩增,反应液中加入荧光染料钙黄绿素作为指示剂,不需任何仪器,在1小时内即可实现对结果的可视化检测。
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公开(公告)号:CN104312913A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410554594.0
申请日:2014-10-17
Applicant: 复旦大学附属华山医院
CPC classification number: C12M45/02 , C12M23/16 , C12M29/04 , C12N15/1003 , C12Q1/689 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明提供了一种整合全血核酸提取、扩增即可视化检测肿瘤基因突变的微流控芯片、以及用所述微流控芯片进行基因突变检测的方法。所述微流控芯片包括细胞裂解室和细胞液滤过单元,所述细胞液滤过单元的下游连通至基因扩增及检测池;所述上游和下游之间设有过滤器。本发明无需对全血中的核酸进行提取,将全血稀释后直接加入到芯片中,通过加热裂解法在芯片上提取DNA,进行扩增,反应液中加入荧光染料钙黄绿素作为指示剂,不需任何仪器,在1小时内即可实现对结果的可视化检测。
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公开(公告)号:CN107164473B
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN201710363814.5
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因1型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物和SEQ ID NO:8所示序列的PNA探针;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因1型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到1%,与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因1型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN110423819A
公开(公告)日:2019-11-08
申请号:CN201910750277.9
申请日:2019-08-14
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/113 , C12N15/11 , A61K45/00 , A61P35/00
Abstract: 本发明开创性地发现一种参与人结直肠癌增殖和耐药的lncRNA其应用,并具体公开了所述lncRNA的转录本的序列结构和用于扩增该转录本序列的引物序列,同时公开了lncRNA可以作为结直肠癌诊断和预后效果的标记物,该lncRNA促进结直肠癌细胞的增殖和增强结直肠癌的耐药性,进而可将其应用于制备诱导肿瘤细胞凋亡的药物。
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公开(公告)号:CN107164538A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710560138.0
申请日:2017-07-11
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q1/6886 , C12Q2600/156 , C12Q2600/166 , C12Q2531/119 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因突变的内参扩增引物组合物,其包括SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:6所示序列的引物;本发明还涉及一种含有上述内参扩增引物组合物的内参扩增体系及其试剂盒和检测方法,以及由上述内参扩增引物组合物扩增的CALR基因突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:7所示序列。本发明所述的内参扩增体系及其检测方法与CALR基因的突变体系配套使用,其既可以对突变型的CALR基因进行快速检测,也可以对野生型的CALR基因进行扩增,作为CALR突变检测试剂盒的内参质控体系,在质量控制的提升方面具有重要意义。
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公开(公告)号:CN107164473A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710363814.5
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因1型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物和SEQ ID NO:8所示序列的PNA探针;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因1型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到1%,与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因1型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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