一种重组嗜热中性蛋白酶及其在降解蛋白质中的应用

    公开(公告)号:CN115260314A

    公开(公告)日:2022-11-01

    申请号:CN202210505122.0

    申请日:2022-05-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种重组嗜热中性蛋白酶及其在降解蛋白质中的应用,属于生物工程技术领域。本发明提供了一种可在枯草芽孢杆菌宿主分泌表达的重组嗜热中性蛋白酶,其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶,及如SEQ ID No.2所示的不带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶。本发明所述的嗜热中性蛋白酶以带有前肽序列形式在枯草芽孢杆菌中分泌表达,实验结果表明具有较高的酶活力,可降解豆粕得到高抗氧化活性的小分子多肽,且在多种洗涤剂中能够稳定发挥酶活力,能够很好地降解血红蛋白,去除血渍。

    碱性嗜热无机焦磷酸酶及其在增强聚合酶链式反应和合成UDP-半乳糖反应中的应用

    公开(公告)号:CN113481180A

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN202110765804.0

    申请日:2021-07-05

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种碱性嗜热无机焦磷酸酶(Inorganic pyrophosphatase,PPase,EC3.6.1.1)及其在增强聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和合成UDP‑半乳糖反应中的应用,属于生物工程技术领域。本发明所述的碱性嗜热无机焦磷酸酶是从嗜热细菌Thermococcus onnurineus NA1中筛选得到,记为碱性嗜热PPase Ton1914,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。结果表明,碱性嗜热PPase Ton1914对于不同长度DNA片段的扩增效率都有明显促进作用,且对于基因长度小的DNA模板的扩增效果更明显。在UDP糖焦磷酸化酶TTE0732催化1‑P‑半乳糖和UTP反应生成UDP‑半乳糖中添加碱性嗜热PPase Ton1914,可以进一步提高反应转化率。

    融合酸性嗜热α-淀粉酶基因和融合酸性嗜热α-淀粉酶、制备及应用

    公开(公告)号:CN102321648B

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201110303402.5

    申请日:2011-10-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,涉及一种融合酸性嗜热α-淀粉酶基因、生产融合酸性嗜热α-淀粉酶的工程菌(大肠埃希氏菌Escherichia coli)JDA001、利用该基因工程菌发酵生产的融合酸性嗜热α-淀粉酶及该酶在淀粉深加工中的应用。通过本发明上述方法分离纯化得到的最终蛋白产品,其纯度达98%以上,比活力为274.97U/mg。本发明通过重叠延伸PCR扩增得到融合酸性嗜热α-淀粉酶基因ST0926-27,将其连入表达载体,在大肠杆菌中成功表达;获得高的回收效率和较好的纯化效果;融合酸性嗜热α-淀粉酶ST0926-27具有较高的最适反应温度、热稳定性和较低的最适pH值,具有很好的工业应用前景。

    嗜热酯酶/磷脂酶基因、工程菌、酶及其应用

    公开(公告)号:CN100587072C

    公开(公告)日:2010-02-03

    申请号:CN03111700.7

    申请日:2003-05-16

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明属于生物工程领域,涉及一种嗜热酯酶/磷脂酶A2的基因、由该基因重组载体在常温宿主中表达的工程菌、利用该工程菌构建的嗜热酯酶/磷脂酶及该酶在工业中的应用。嗜热酯酶/磷脂酶A2基因(其核苷酸序列如:SEQ ID NO.1)来源于嗜热古生菌Aeropyrum pernix Kl;采用生物工程技术,通过古生菌的培养、目的基因钓取、构建表达载体、及将载体转化到宿主细胞中4个步骤构建了一种工程菌(CGMCC NO.0844),工程菌经发酵离心、收集沉淀、冻融、超声破碎、热处理、亲和层析等步骤纯化获得嗜热酯酶/磷脂酶A2。本发明所述嗜热酯酶/磷脂酶具有制备工艺简单、催化底物水解能力强、酶活力高等优点。

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