公开(公告)号：CN113481180A

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN202110765804.0

申请日：2021-07-05

Applicant: 吉林大学

Inventor： 高仁钧 ,  李雅静 ,  杨雪 ,  解桂秋

IPC: C12N9/14 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/686 ,  C12P19/30

Abstract: 一种碱性嗜热无机焦磷酸酶(Inorganic pyrophosphatase,PPase,EC3.6.1.1)及其在增强聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和合成UDP‑半乳糖反应中的应用，属于生物工程技术领域。本发明所述的碱性嗜热无机焦磷酸酶是从嗜热细菌Thermococcus onnurineus NA1中筛选得到，记为碱性嗜热PPase Ton1914，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。结果表明，碱性嗜热PPase Ton1914对于不同长度DNA片段的扩增效率都有明显促进作用，且对于基因长度小的DNA模板的扩增效果更明显。在UDP糖焦磷酸化酶TTE0732催化1‑P‑半乳糖和UTP反应生成UDP‑半乳糖中添加碱性嗜热PPase Ton1914，可以进一步提高反应转化率。

公开(公告)号：CN102321648B

公开(公告)日：2012-12-26

申请号：CN201110303402.5

申请日：2011-10-10

Applicant: 吉林大学

Inventor： 高仁钧 ,  解桂秋 ,  常琳 ,  潘冬 ,  曹淑桂

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/28 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种融合酸性嗜热α-淀粉酶基因、生产融合酸性嗜热α-淀粉酶的工程菌(大肠埃希氏菌Escherichia coli)JDA001、利用该基因工程菌发酵生产的融合酸性嗜热α-淀粉酶及该酶在淀粉深加工中的应用。通过本发明上述方法分离纯化得到的最终蛋白产品，其纯度达98％以上，比活力为274.97U/mg。本发明通过重叠延伸PCR扩增得到融合酸性嗜热α-淀粉酶基因ST0926-27，将其连入表达载体，在大肠杆菌中成功表达；获得高的回收效率和较好的纯化效果；融合酸性嗜热α-淀粉酶ST0926-27具有较高的最适反应温度、热稳定性和较低的最适pH值，具有很好的工业应用前景。