精恶唑禾草灵水解酯酶基因、含有该基因的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN102643841B

    公开(公告)日:2013-02-20

    申请号:CN201110189139.1

    申请日:2011-07-07

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及精恶唑禾草灵水解酯酶基因、含有该基因的工程菌及其应用。精恶唑禾草灵水解酯酶基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。其所编码的精恶唑禾草灵水解酯酶蛋白质,其氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。将该精恶唑禾草灵水解酯酶基因构建重组质粒再导入E.coli BL21(DE3)即获得含有该基因的基因工程菌。所述精恶唑禾草灵水解酯酶基因可在水解芳氧苯氧丙酸类除草剂、三酰甘油酯和对硝基苯酯等方面应用。利用该基因生产的酶制剂可用于环境的生物修复、食品加工、医药、洗涤等行业,不仅可以解决精恶唑禾草灵的环境污染问题,还可以取得可观的经济效益。

    纤维素水解酶β-1,4葡聚糖内切酶基因

    公开(公告)号:CN101736023A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN201010018298.0

    申请日:2010-01-22

    Abstract: 本发明涉及纤维素水解酶β-1,4葡聚糖内切酶基因,属于应用工业微生物领域。本发明提供了纤维素水解酶系中关键酶之一的β-1,4葡聚糖内切酶基因及其所推导的水解酶蛋白质。该基因全长为1332bp,G+C含量为43.77%,编码443个氨基酸,为新的纤维素水解酶基因资源。利用该基因构建的工程菌株能高效表达β-1,4葡聚糖内切酶,该酶在以羧甲基纤维素钠为底物时的Km值和Vmax分别是19.92mg/ml和1941μmolmin-1mg-1,生产的酶制剂可用于食品,医药,饲料,纺织、洗涤等工业,不仅可以解决纤维素的再利用问题,还可以取得可观的经济效益。

    一种利用β-1,6葡聚糖酶联产酵母葡聚糖、甘露糖蛋白和酵母提取物的方法

    公开(公告)号:CN109912700A

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201910220003.9

    申请日:2019-03-22

    Abstract: 本发明公开一种利用β-1,6葡聚糖酶联产酵母葡聚糖、甘露糖蛋白和酵母提取物的方法,该方法以酵母细胞为原料,通过对酵母细胞进行高温灭活处理,离心,干燥上清得到酵母提取物;利用β-1,6葡聚糖酶酶解酵母细胞壁,离心,离心分别得到的酶解液上清和酶解沉淀,酶解液上清经水提醇沉、离心分离、干燥得到甘露糖蛋白;乙醇经回收后,剩余液体部分经浓缩、喷雾干燥得到酵母提取物;酶解沉淀经脱脂、蛋白酶处理、喷雾干燥得到酵母葡聚糖。本发明制备的酵母葡聚糖和甘露糖蛋白纯度高、得率高,且制备过程成本低,不使用强酸、强碱试剂,对环境污染小。

    一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102337343B

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201110344297.X

    申请日:2011-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒,该方法是在参考相关研究的基础上,采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势,取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤,从而减少了国标方法中的繁琐步骤,提高了检测效率,同时也采用了国标法中的前增菌步骤,来提高检测目的病原菌的准确性,由于土壤自身的复杂性,土壤中存在着大量微生物,其中还包括不同名目的各种病原微生物,为了更好更准确地定量检测目的病原菌,采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证,最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到沙门氏菌定量检测方法的灵敏度为250个/g土壤。

    一种定量检测土壤中大肠杆菌的方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102337344A

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN201110344298.4

    申请日:2011-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中大肠杆菌的方法及其检测试剂盒,该方法是在参考相关研究的基础上,采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势,取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤,从而减少了国标方法中的繁琐步骤,提高了检测效率,同时也采用了国标法中的前增菌步骤,来提高检测目的病原菌的准确性,由于土壤自身的复杂性,土壤中存在着大量微生物,其中还包括不同名目的各种病原微生物,为了更好更准确地定量检测目的病原菌,采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证,最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到大肠杆菌定量检测方法的灵敏度为25个/g土壤。

    精恶唑禾草灵水解酯酶基因、含有该基因的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN102643841A

    公开(公告)日:2012-08-22

    申请号:CN201110189139.1

    申请日:2011-07-07

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及精恶唑禾草灵水解酯酶基因、含有该基因的工程菌及其应用。精恶唑禾草灵水解酯酶基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。其所编码的精恶唑禾草灵水解酯酶蛋白质,其氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。将该精恶唑禾草灵水解酯酶基因构建重组质粒再导入E.coli BL21(DE3)即获得含有该基因的基因工程菌。所述精恶唑禾草灵水解酯酶基因可在水解芳氧苯氧丙酸类除草剂、三酰甘油酯和对硝基苯酯等方面应用。利用该基因生产的酶制剂可用于环境的生物修复、食品加工、医药、洗涤等行业,不仅可以解决精恶唑禾草灵的环境污染问题,还可以取得可观的经济效益。

    一种rRNA嵌合启动子及含有该嵌合启动子的表达载体

    公开(公告)号:CN101993878B

    公开(公告)日:2012-04-18

    申请号:CN201010506356.4

    申请日:2010-10-14

    Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了一种rRNA嵌合启动子及含有该嵌合启动子的表达载体。该嵌合启动子是在大肠杆菌rRNArrnB操纵元启动子P1的上下游分别插入乳糖操纵元的两个lacO1启动子;或者在大肠杆菌rRNA操纵元启动子P1的上下游分别插入阿拉伯糖操纵元的araI1和araO2启动子,形成环状DNA结构实现对启动子P1的控制。该诱导型表达载体由载体pET29a的T7启动子被所述的rRNArrnBP1嵌合启动子代替所得。本发明所述嵌合启动子及表达载体pRNP2和pRBB可以方便的实现在多种大肠杆菌菌株中进行外源基因的高效表达,其中pRBB还可以用于基因的定向进化。

    一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102337343A

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN201110344297.X

    申请日:2011-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒,该方法是在参考相关研究的基础上,采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势,取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤,从而减少了国标方法中的繁琐步骤,提高了检测效率,同时也采用了国标法中的前增菌步骤,来提高检测目的病原菌的准确性,由于土壤自身的复杂性,土壤中存在着大量微生物,其中还包括不同名目的各种病原微生物,为了更好更准确地定量检测目的病原菌,采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证,最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到沙门氏菌定量检测方法的灵敏度为250个/g土壤。

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