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公开(公告)号：CN115216478B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210618518.6
申请日：2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒，进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中，成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团，成功改造巴氏杆菌；且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株，表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降；同时，能使细胞因子IL‑6，TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降，减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比，保护效率更高，安全性也更好，能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号：CN115927426B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202210877323.3
申请日：2022-07-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及多杀性巴氏杆菌基因缺失突变株的筛选系统及其应用，属于生物技术领域，本发明首先构建含有多杀性巴氏杆菌glgB和opa基因敲除盒与lacZ基因的重组表达载体，将所述重组表达载体导进改造目的菌株C48‑1株，分别通过利用温度敏感系统与蓝白斑筛选，方便高效地筛选出突变株。该方法实现了多杀性巴氏杆菌基因的成功敲除，并能够大幅度地减少了筛选突变株的时间和精力，达到高效快速地筛选突变株。
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公开(公告)号：CN114836460B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202210553568.0
申请日：2022-05-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种表达微菌素Y的枯草芽孢杆菌工程菌株及其制备和应用，属于基因工程技术和生物技术领域，本发明首先将mcyA和mcyBCD的基因序列调整为相同方向，并且用SD和起始密码子序列相连获取mcyABCD改造基因，然后以PHT43作为载体，通过枯草芽孢杆菌对改造后的mcyABCD基因进行表达并成功表达MccY，其表达产物具有良好的鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌的杀菌活性，为MccY在养殖业生产实践中的应用提供了更经济便捷的模式。
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公开(公告)号：CN114574412B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210149824.X
申请日：2022-02-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12P21/02 , C07K14/245 , A61K35/742 , A61K38/16 , A61P31/04 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种表达MccJ25的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。该工程菌通过将套索肽MccJ25改造后的mcjABCD序列克隆到枯草芽孢杆菌上构建得到；其中，mcjABCD序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中构建的枯草芽孢杆菌工程菌能够成功表达MccJ25，且由于枯草芽孢杆菌属于食品级益生菌，可以避免内毒素的影响，因此，可将其作为生产MccJ25的益生菌使用；同时，该工程菌还对肠炎沙门氏菌等具有较强的抑制作用，可用在抗菌产品方面，以提升MccJ25的应用价值。
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公开(公告)号：CN113527476A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110714355.7
申请日：2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用，所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接，构建表达载体，诱导融合蛋白表达，来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达，从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题，提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒，特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113046387A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201911380957.2
申请日：2019-12-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因检测鸡IFN‑α生物学活性的方法，属于干扰素活性检测技术领域。本发明利用双荧光素酶报告基因检测系统，将鸡Mx蛋白的启动子片段插入带有萤火虫荧光素酶的质粒中，构建表达萤光虫荧光素酶的重组质粒PGL 3 basic‑Mxp，通过检测荧光素酶的表达量，来判断Mx蛋白的启动子的激活情况，从而检测鸡IFN‑α生物学活性。本发明利用双荧光素酶报告基因检测鸡IFN‑α生物学活性的方法准确性好、可重复性高，成本低、操作简单，可实现鸡α干扰素的规模化生产。
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公开(公告)号：CN113045670A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201911381263.0
申请日：2019-12-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用。本发明融合蛋白包括鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白。本发明通过基因工程的方法，将鸡α干扰素基因与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因连接，并进行密码子优化，构建表达载体，诱导融合蛋白表达，来促进鸡α干扰素在表达系统中的可溶表达，从而解决了鸡α干扰素在原核系统呈不可溶的难题，提高了准确性和重复性。本发明提供的鸡α干扰素融合蛋白的生产方法操作简单、成本低，可实现鸡α干扰素规模化生产。本发明生产的鸡α干扰素融合蛋白具有良好的生物学活性和稳定性，对鸡病毒性传染病的防治具有重大的意义。
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公开(公告)号：CN113527476B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202110714355.7
申请日：2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用，所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接，构建表达载体，诱导融合蛋白表达，来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达，从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题，提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒，特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号：CN114990035A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210365852.5
申请日：2022-04-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/65 , C12N15/31 , A61K35/742 , A61K8/99 , A61Q19/00 , A23L33/135 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株枯草芽孢杆菌BS168感受态工程菌株及其应用，该枯草芽孢杆菌BS168‑PxylA‑comK重组菌株在Amye位点中插入有PxylA‑comK基因，且不含有抗性标签。本发明中的枯草芽孢杆菌BS168‑PxylA‑comK重组菌株相比BS168野生菌株具有更强的质粒转化效果，能够兼容各类不同的位点重组，且由于其改造程度低，因此，可作为一种优良工程菌株的原始菌株使用。而且该菌株的改造成本低，具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN113121680A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202110390340.X
申请日：2021-04-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61K39/44 , A61P31/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物药物技术领域，具体涉及一种抗H5亚型禽流感纳米抗体蛋白及其编码基因与应用。所述的抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白特异性针对甲型H5亚型禽流感病毒可以解决现有H5亚型禽流感诊断试剂研发过程中抗体亲和力低、生产过程中纯度低、检测过程中灵敏度低的问题。本发明进一步将抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白在大肠杆菌体内和麦芽糖结合蛋白标签融合表达，可实现快速检测抗原，并应用于甲型H5亚型禽流感快速检测试剂盒的开发，且该融合蛋白可用于防治甲型H5亚型禽流感产品的开发。
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