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公开(公告)号:CN106399322A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743783.1
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺,包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对NCBI中已发表的鸡β干扰素基因进行密码子优化,人工合成优化后鸡β干扰素基因;S2、设计引物:根据密码子优化后的干扰素基因,设计1对引物;S3、重组表达质粒的构建;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过原核表达的方式表达并纯化出了重组鸡β干扰素蛋白,并通过细胞病变抑制法测出了该干扰素的具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到2.73×106UI/mg。
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公开(公告)号:CN118956777A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411031234.2
申请日:2024-07-30
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒减毒株,所述鸭坦布苏病毒减毒株的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述鸭坦布苏病毒减毒株能够免疫雏鸭并使得雏鸭产生有效的鸭坦布苏病毒抗体,对于雏鸭的保护率达到了100%,同时雏鸭的体重增长未受到影响,未出现排毒、死亡和病毒血症,且雏鸭的主要脏器中未检测到鸭坦布苏病毒。所述鸭坦布苏病毒减毒株还能够作为活载体嵌合H5N6亚型禽流感病毒抗原表位进而构建活载体疫苗毒株,所述活载体疫苗毒株能够免疫雏鸭并有效降低H5N6亚型禽流感病毒对雏鸭的损伤。
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公开(公告)号:CN117144064A
公开(公告)日:2023-12-01
申请号:CN202311199465.X
申请日:2023-09-15
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒CRISPR‑Cas12a RT‑LAMP检测引物组,包括适用于鸭坦布苏病毒核酸检测的RT‑LAMP引物对和crRNA。使用该引物组检测鸭坦布苏病毒从RT‑LAMP扩增到最终结果读取仅需要45分钟,且其RNA最低检测限可达3copies/μL,和其它常见禽病毒均无交叉反应,检测过程中所有反应体系均可在恒温水浴锅中进行,不依赖特殊的热循环设备,且检测结果在便携式蓝光或紫外光照射仪上即可呈现。在临床样本测试中,使用该引物组检测鸭坦布苏病毒的阳性符合率和阴性符合率均与SYBR Green qPCR相当,该引物组可应用于鸭坦布苏病毒的临床现地快速特异性检测中。
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公开(公告)号:CN106939042B
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN201710045372.X
申请日:2017-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供一种猪α干扰素及其应用,依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性,选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素,其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示,编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单,成本低,易于工业化生产,猪α干扰素表达量高,包涵体处理过程中变性彻底,复性蛋白得率高,本发明制得的猪α干扰素效价高,能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒,比活性高达108,具有较好的生物学活性功能,可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物,具备广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN106399321A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743781.2
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺,其包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成该鸡α干扰素基因;S2、根据密码子优化后的鸡α干扰素基因,设计三条特异性的引物;S3、构建含ProS2促溶标签的重组鸡α干扰素质粒;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组鸡α干扰素的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过细胞病变抑制法测出了该干扰素具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到7.32×107UI/mg。
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公开(公告)号:CN101838708B
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201010140176.9
申请日:2010-03-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种检测犬流感的方法,采用PCR检测方法,其PCR反应体系中包含以下物质:序列分别为SEQ ID NO:1、SEQID NO:2的引物、dNTPs、Ex Taq、10×Ex Taq buffer、cDNA模板。在PCR反应结束后,通过电泳及紫外分析,检测有无目的条带,从而判断犬只是否患病。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性强、操作简便、快速,并且对起始材料质量要求低,便于临床上的应用。
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公开(公告)号:CN116837028A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310994084.4
申请日:2023-08-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明公开了一种野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒,所述野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒能够在原核细胞中稳定表达,无基因插入、缺失和突变,且能够直接用于转染以拯救活病毒,无需昂贵的试剂进行体外转录来获取病毒RNA,节约了成本和时间;并且本发明在S132全长cDNA的5’UTR和C蛋白基因之间插入报告基因,获得嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cDNA感染性克隆质粒,利用其制备的嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒经过空斑纯化后能够至少稳定表达10代绿色荧光蛋白。
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公开(公告)号:CN113308477A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110379859.8
申请日:2021-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的鸭IL‑2基因真核表达重组质粒及其制备方法。本发明首先根据鸭密码子偏嗜性将鸭IL‑2基因进行优化,所得优化的鸭IL‑2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,再将优化的鸭IL‑2基因连接到真核表达载体pCAGGK,得到了鸭IL‑2基因真核表达重组质粒。本发明获得的真核表达重组质粒在细胞内能成功表达鸭IL‑2蛋白,真核表达重组质粒可作为免疫增强剂和免疫佐剂使用,增强鸭类体内细胞和体液免疫反应,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN106520779A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201610984478.1
申请日:2016-11-09
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K14/55 , C12N15/85 , C12N2800/106 , C12N2800/22
Abstract: 本发明提供了一种通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,将鸡的IL-2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化,得到的优化后的基因optiCKIL-2;将优化基因optiCKIL-2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL-2。所述通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,根据鸡的密码子偏嗜性进行优化后,提高鸡IL-2的蛋白表达效率,为鸡IL-2构建DNA疫苗或作为佐剂奠定基础。
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公开(公告)号:CN106039303A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610457461.0
申请日:2016-06-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/53 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明涉及DNA疫苗技术领域,具体地,涉及一种H5亚型禽流感DNA疫苗及其制备方法,所述H5亚型禽流感DNA疫苗由H5亚型禽流感病毒HA基因和真核表达载体组成。所述的H5亚型禽流感DNA疫苗能够预防H5亚型禽流感,减少感染,对养殖业与人类健康具有十分重要的意义。
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