公开(公告)号：CN108261543B

公开(公告)日：2019-03-08

申请号：CN201810128488.4

申请日：2018-02-08

Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 ,  华南农业大学 ,  肇庆大华农生物药品有限公司 ,  甘肃健顺生物科技有限公司

Inventor： 陈瑞爱 ,  罗顺 ,  李延鹏 ,  温良海 ,  蔡仕君 ,  张晓楠 ,  罗琼

IPC: A61K39/17 ,  A61K39/215 ,  A61K39/145 ,  C12N7/00 ,  A61P31/14 ,  A61P31/16 ,  C12R1/09

Abstract: 本发明提供了一种传代细胞源鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗的制备方法及其应用，包括步骤如下：取EB66细胞于生物反应器中进行生长培养，用于病毒接种；采用二阶培养法，向EB66细胞接种新城疫病毒、传染性支气管炎病毒或禽流感病毒；在接毒24h后，病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到病毒液；重复上述步骤以分别获得新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液并灭活；将灭活后的新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液混合，制备灭活疫苗。本发明采用EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒、传染性支气管炎和禽流感病毒的培养，避免了使用鸡胚造成胚体异源蛋白和外源病毒污染的风险，提高病毒的生产品质，简化病毒的生产工艺。

公开(公告)号：CN109295008A

公开(公告)日：2019-02-01

申请号：CN201811172271.X

申请日：2018-10-09

Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 ,  华南农业大学 ,  肇庆大华农生物药品有限公司 ,  甘肃健顺生物科技有限公司

Inventor： 温良海 ,  陈瑞爱 ,  蔡仕君 ,  叶俊贤 ,  谭银娟

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/073 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鸭肝炎病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞接种鸭肝炎病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的ELD50，在病毒ELD50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭肝炎病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。

公开(公告)号：CN108486041A

公开(公告)日：2018-09-04

申请号：CN201810269359.7

申请日：2018-03-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  朱娇娇 ,  李慧敏 ,  李延鹏 ,  温良海 ,  罗琼

IPC: C12N5/073 ,  C12N5/077 ,  C12N7/00 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/70 ,  G01N33/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种PI3K/Akt信号通路在鸡胚成纤维细胞内对马立克氏病毒增殖的应用及其检测方法，涉及生物信息学技术领域。上述PI3K/Akt信号通路在抑制鸡胚成纤维细胞中马立克氏病病毒增殖的应用证明可以通过抑制PI3K/Akt信号通路，进而抑制马立克氏病毒在鸡胚成纤维细胞内的增殖表达，该应用对进一步揭示鸡的马立克氏病的致病机制以及研发新的针对鸡马立克氏病的抗病毒策略具有积极的意义。同时本发明还优化了适用于检验MDV感染激活PI3K/Akt信号通路的免疫印记实验方法以及检验鸡马立克氏病毒DNA分子水平检测的PCR反应体系和条件。本发明提供的检测方法具有特异性高，灵敏性强和重复性好的特点。