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公开(公告)号:CN101962673A
公开(公告)日:2011-02-02
申请号:CN201010131822.5
申请日:2010-03-25
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法;涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现:首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件,如Targetscan,预测某一miRNA的可能靶基因,然后利用生物芯片或实时定量PCR,测定细胞内可能靶基因mRNA质核比变化,寻找mRNA质核比值大于1的可能靶基因,最后经Western blot在蛋白质水平进一步确证即可。
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公开(公告)号:CN101619348A
公开(公告)日:2010-01-06
申请号:CN200810132913.3
申请日:2008-07-01
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明为临床肿瘤病理组织切片-SELEX技术方法的建立和应用,属于生物技术领域,涉及病理组织切片消减SELEX筛选方法,以及其在疾病分子探针的制备和生物标志物的筛选方面的应用。本发明通过建立的石蜡包埋病理组织切片的消减SELEX筛选方法,获得该病理组织特异的单链DNA寡核苷酸配基,可以作为探针用于特定疾病包括肿瘤的检测与辅助诊断等。获得的寡核苷酸配基还可亲和纯化靶分子,用于分离、鉴定疾病状态相关的分子标志物,如肿瘤标志物。
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公开(公告)号:CN101619335A
公开(公告)日:2010-01-06
申请号:CN200810132914.8
申请日:2008-07-01
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种利用茎环样结构的引物经PCR制备不同长度的正、负链产物,切胶回收制备单链DNA的方法。通过针对不同的DNA模板设计的下游茎环结构引物,改进PCR条件,证实PCR产物均为预期的长、短两条链,可以很容易的通过变性胶分离、纯化。本发明在涉及单链DNA制备的生物医学研究领域包括SELEX技术方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN101619335B
公开(公告)日:2012-04-18
申请号:CN200810132914.8
申请日:2008-07-01
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种利用茎环样结构的引物经PCR制备不同长度的正、负链产物,切胶回收制备单链DNA的方法。通过针对不同的DNA模板设计的下游茎环结构引物,改进PCR条件,证实PCR产物均为预期的长、短两条链,可以很容易的通过变性胶分离、纯化。本发明在涉及单链DNA制备的生物医学研究领域包括SELEX技术方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN102391372A
公开(公告)日:2012-03-28
申请号:CN201110349994.4
申请日:2011-11-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
IPC: C07K14/47 , C07K1/14 , G01N33/68 , A61K39/395 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了属于医学肿瘤学技术领域的一种肝癌药物治疗的靶标Vasorin蛋白及其应用。本发明通过液相差异SELEX的方法,以伴肝外转移的AFP阴性HCC患者血清为靶标,以正常人血清为消减靶标,获得特异识别肝癌患者血清的富集单链DNA文库,然后,利用凝胶阻滞的方法,鉴定出一个与正常血清成分差异差异蛋白-Vasorin蛋白。RNAi沉默Vasorin蛋白的表达后,细胞凋亡增加,细胞迁移减弱,证实Vasorin蛋白是肝癌治疗的有效靶标。
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公开(公告)号:CN102382813A
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201010266267.7
申请日:2010-08-30
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明涉及一种针对液相非纯化复合靶标的电泳凝胶阻滞-SELEX技术方法的建立和应用。具体是将非纯化的靶标与单链寡核苷酸文库在液相中孵育,利用电泳凝胶阻滞的原理,通过消减筛选,获得针对筛选样品与消减样品中差异成分的特异寡核苷酸适配子,用作靶标的检测与功能抑制等。获得的寡核苷酸适配子还可用于鉴定和发现疾病相关的分子标志物。
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公开(公告)号:CN101665821A
公开(公告)日:2010-03-10
申请号:CN200810146520.8
申请日:2008-09-01
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及特异识别金黄色葡萄球菌的五条的寡核苷酸适配子的序列和应用。通过细菌消减SELEX技术获得了五条特异识别金黄色葡萄球菌的单链DNA寡核苷酸适配子,标记FITC后,经荧光染色证明该五条适配子能够特异识别金黄色葡萄球菌菌株。该五条配基组合应用后,能够提高对靶细菌识别的敏感性及对不同金葡菌菌株、不同生长状态的金葡菌的检出率。因此,该五条适配子序列在快速检出样品包括可疑恐怖袭击生物制剂中的金黄色葡萄球菌,鉴别金黄色葡萄球菌与其它革兰氏阳性球菌方面具有广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN104450703A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410143207.4
申请日:2014-04-11
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种利用miR-146a为标志物的肝癌患者血清检测试剂盒及方法。本发明设计miR-146a特异性的引物,采用定量PCR的方法检测正常人血清、肝癌患者血清中miR-146a的含量变化,含量显著降低为肝癌患者血清。本发明的方法简单,迅速,灵敏,适用于检测患者是否患有肝癌。
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公开(公告)号:CN104017860A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410143184.7
申请日:2014-04-11
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
CPC classification number: C12Q1/6883 , C12Q2600/158 , C12Q2600/178
Abstract: 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种利用miR-152为标志物的动脉粥样硬化血清检测试剂盒及方法。本发明设计miR-152特异性的引物,采用定量PCR的方法检测正常人血清、动脉粥样硬化患者血清中miR-152的含量变化,含量显著降低为动脉粥样硬化患者血清。本发明的方法简单,迅速,灵敏,适用于检测患者是否患有动脉粥样硬化。
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公开(公告)号:CN102391372B
公开(公告)日:2014-07-23
申请号:CN201110349994.4
申请日:2011-11-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
IPC: C07K14/47 , C07K1/14 , G01N33/68 , A61K39/395 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了属于医学肿瘤学技术领域的一种肝癌药物治疗的靶标Vasorin蛋白及其应用。本发明通过液相差异SELEX的方法,以伴肝外转移的AFP阴性HCC患者血清为靶标,以正常人血清为消减靶标,获得特异识别肝癌患者血清的富集单链DNA文库,然后,利用凝胶阻滞的方法,鉴定出一个与正常血清成分差异差异蛋白-Vasorin蛋白。RNAi沉默Vasorin蛋白的表达后,细胞凋亡增加,细胞迁移减弱,证实Vasorin蛋白是肝癌治疗的有效靶标。
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