诱导人胚胎干细胞或人诱导形成的多潜能干细胞向肝细胞分化的方法

    公开(公告)号:CN101962630B

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN200910089765.6

    申请日:2009-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种诱导形成的多潜能干细胞分化成肝细胞的方法,该方法是将诱导形成的多潜能干细胞在分化培养基I中培养,然后再转入含有胰岛素-转铁蛋白-硒盐的分化培养基I中培养,最后在含有成纤维细胞生长因子和骨形态形成蛋白的肝细胞培养基中培养获得肝脏前体细胞,促进所述肝细胞成熟,获得肝细胞;所述分化培养基I为含有活化素A的基础细胞培养基。用本发明的诱导形成的多潜能干细胞分化成肝细胞的方法诱导人iPS细胞向肝脏细胞分化具有周期短、分化效率高、安全稳定的优点,分化获得的肝细胞可用于细胞移植治疗肝病、人工肝脏和药物的毒性测试等,此外整个分化过程也可用于人类早期胚胎肝脏发育的研究,应用前景广阔。

    肝脏内胚层细胞及其制备和纯化方法

    公开(公告)号:CN101962628A

    公开(公告)日:2011-02-02

    申请号:CN200910089693.5

    申请日:2009-07-24

    Abstract: 本发明公开了一种肝脏内胚层细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏内胚层细胞,是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得的至少表达甲胎蛋白、肝细胞核因子4A和神经性钙黏附蛋白这三种标志性蛋白的肝脏内胚层细胞。本发明还提供了肝脏内胚层细胞的制备方法,包括以下步骤1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养;2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养;3)步骤2)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养。本发明的肝脏内胚层继续培养可获得肝脏前体细胞。这些肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。

    人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN1844374A

    公开(公告)日:2006-10-11

    申请号:CN200610078382.5

    申请日:2006-05-17

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基。该培养基配方为:N2 5-30mL,B27 10-60mL,谷氨酰胺0.0146-0.73g,β-巯基乙醇5-10μL,非必需氨基酸中的一种或几种共计:3-30mL,碱性成纤维细胞生长因子20-200mg,小牛血清白蛋白0.2-0.8g;用DMEM/F12定容至1000mL,pH 7.2-7.8。该培养基成分确定,且无任何动物来源的成分,使用安全性高。用本发明人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基对人胚胎干细胞进行培养具有增殖快、凋亡率低、安全稳定、传代时间长的优点。本发明将在人胚胎干细胞的培养中发挥重要作用,以满足临床及医学研究中对人胚胎干细胞的需求,应用前景广阔。

    SARS冠状病毒的假病毒及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN1552851A

    公开(公告)日:2004-12-08

    申请号:CN03138168.5

    申请日:2003-06-06

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明涉及SARS冠状病毒的假病毒及其制备方法和用假病毒进行SARS冠状病毒中和抗体及药物筛选研究方面的用途。所述假病毒是将SARS病毒的囊膜蛋白SPIKE参与到带有报告基因的缺损型病毒基因组的包装中而得到的。所述假病毒的制备方法是将含有SARS囊膜蛋白的质粒一、含有携带报告基因的缺损型的其它病毒基因组的质粒二转染到包装细胞系中,30~60小时后收集细胞上清,然后从中提取并纯化所得的SARS假病毒颗粒。假病毒感染模型的建立为寻找SARS病毒的受体,研究该病毒的侵染机理,寻找抗病毒的药物,研究抗病毒的中和抗体和疫苗效果评价提供了新的简便的实验方法。

    肝脏前体细胞及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101962629A

    公开(公告)日:2011-02-02

    申请号:CN200910089695.4

    申请日:2009-07-24

    Abstract: 本发明公开了一种肝脏前体细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏前体细胞是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得表达早期肝脏标志基因甲胎蛋白(AFP)和表达胆管的标志基因角蛋白19(KRT19)和角蛋白7(KRT7)的细胞,其具有强增殖能力并具有向类肝实质细胞和类胆管细胞双向分化潜能。肝脏前体细胞的制备方法包括如下步骤:1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养;2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养;3)步骤2)获得的细胞在内胚层诱导培养基III上培养;4)步骤3)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养;5)所述肝脏内胚层细胞在STO细胞作为饲养层上用肝脏前体细胞培养基进行培养,获得肝脏前体细胞。本发明的肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。

    人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN100465268C

    公开(公告)日:2009-03-04

    申请号:CN200610078382.5

    申请日:2006-05-17

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基。该培养基配方为:N25-30mL,B2710-60mL,谷氨酰胺0.0146-0.73g,β-巯基乙醇5-10μl,非必需氨基酸中的一种或几种共计:3-30mL,碱性成纤维细胞生长因子20-200mg,小牛血清白蛋白0.2-0.8g;用DMEM/F12定容至1000mL,pH 7.2-7.8。该培养基成分确定,且无任何动物来源的成分,使用安全性高。用本发明人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基对人胚胎干细胞进行培养具有增殖快、凋亡率低、安全稳定、传代时间长的优点。本发明将在人胚胎干细胞的培养中发挥重要作用,以满足临床及医学研究中对人胚胎干细胞的需求,应用前景广阔。

    诱导人胚胎干细胞向肝脏细胞分化的方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN1884494A

    公开(公告)日:2006-12-27

    申请号:CN200610089307.9

    申请日:2006-06-16

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种诱导人胚胎干细胞向肝脏细胞分化的方法及其专用培养基。该培养基由以下2种培养基组成:分化养基I是在RPMI 1640培养基的基础上添加了80-120ng/L活化素A;分化培养基II是在HCM培养基的基础上添加了20-60ng/mL成纤维细胞生长因子和15-25ng/mL骨形态形成蛋白。本发明的培养基成分确定,使用安全性高;诱导方法具有周期短、分化率高、安全稳定的优点,应用前景广阔。

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