一种毛竹幼胚离体再生及遗传转化的方法

    公开(公告)号:CN112813096B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN202110025934.0

    申请日:2021-01-08

    Abstract: 本发明公开了一种毛竹幼胚离体再生及遗传转化的方法,该方法包含:毛竹幼胚愈伤组织的诱导、毛竹愈伤组织的增殖、转化载体pER8‑WUS‑RdCodA的构建、农杆菌侵染、毛竹抗性愈伤组织的筛选与不定芽的分化、转基因植株再生与炼苗移栽和毛竹转基因再生植株检测。其中,转化载体pER8‑WUS‑RdCodA的构建包含:将雌二醇诱导载体pER8进行Xho I/Spe I双酶切;在玉米WUS基因两端加入载体同源序列,将其插入酶切后的pER8载体中,将Rd29A启动子诱导的CodA基因完整表达框插入EcoR V位点,以构建转化载体pER8‑WUS‑RdCodA。本发明的方法能够缩短转化周期,提高转化效率。

    文心兰离体叶片诱导体胚的方法

    公开(公告)号:CN101940162A

    公开(公告)日:2011-01-12

    申请号:CN201010503411.4

    申请日:2010-10-12

    Abstract: 本发明公开了从文心兰离体叶片诱导体胚并最终获得再生植株的方法,属于生物技术和现代农业技术领域。本发明以文心兰(Oncidiumflexuosum)“百万金币”无菌苗叶片为外植体,培养基为添加TDZ、6-苄基腺嘌呤和细胞激动素的改良1/2MS培养基,24-26℃暗培养50-60天,90%以上的叶片能诱导生成体胚,体胚发生的位置在叶尖、叶切口、叶面和叶缘,这些体胚均能进一步发育成类原球茎(PLBs),最终获得正常的再生植株。采用本发明建立的文心兰离体叶片-体胚-植株再生体系,为文心兰育种提供了大量源于叶片的胚性单细胞,这些能形成体胚-类原球茎并可获得再生植株的胚性单细胞是转基因育种工程的最佳受体细胞。

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