公开(公告)号：CN108410785B

公开(公告)日：2021-11-02

申请号：CN201810139232.3

申请日：2018-02-09

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) ,  哈尔滨维科生物技术开发公司

Inventor： 王春来 ,  刘思国 ,  于申业 ,  李刚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种制备细菌菌影以及基因工程亚单位疫苗的方法，包括将INP信号序列和外源基因以及裂解盒基因E‑lysis克隆到同一个表达载体，转化细菌，其中INP的信号序列为SEQ ID NO：1表示的序列，裂解盒基因E‑lysis的序列为SEQ ID NO：2表示的序列，以及表达外源基因的重组细菌菌影在制备疫苗中的应用。

公开(公告)号：CN114686608A

公开(公告)日：2022-07-01

申请号：CN202011643292.2

申请日：2020-12-30

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 李刚 ,  刘思国 ,  王春来 ,  张跃灵 ,  张万江

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及基于CRISPR‑Cas12a的胸膜肺炎放线杆菌快速可视化检测方法。具体涉及试剂盒，其包含一对针对apxIV的特异性引物对SEQ ID NO：14和15、16和17、18和19、20和21，或26和27(优选SEQ ID NO：26和27)，以及针对上述引物扩增的产物的序列为SEQ ID NO：3、5、6或8(优选SEQ ID NO：8)的gRNA，其用于快速可视化检测胸膜肺炎放线杆菌。本发明基于RPA及CRISPR/Cas12a系统的检测方法，利用Cas12a蛋白，根据App的特异性基因apxIV设计特异性重组酶聚合酶扩增(RPA)引物及CRISPR/Cas12a系统探针，以实现RPA特异性靶基因扩增，以及CRISPR/Cas12a系统对报告基因的切割，建立可用于检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法，并对RPA体系和CRISPR/Cas12a反应体系进行优化。该方法快速，可视，且特异性好，敏感度高，可用于临床检测。

公开(公告)号：CN108410785A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810139232.3

申请日：2018-02-09

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 王春来 ,  刘思国 ,  于申业 ,  李刚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12N2750/10022 ,  C12N2750/10034

Abstract: 本发明涉及一种制备细菌菌影以及基因工程亚单位疫苗的方法，包括将INP信号序列和外源基因以及裂解盒基因E-lysis克隆到同一个表达载体，转化细菌，其中INP的信号序列为SEQ ID NO：1表示的序列，裂解盒基因E-lysis的序列为SEQ ID NO：2表示的序列，以及表达外源基因的重组细菌菌影在制备疫苗中的应用。