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公开(公告)号：CN119979745A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510299515.4
申请日：2025-03-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种与艾美耳球虫马杜霉素耐药性相关的SNP分子标记及其应用。本发明通过对鸡柔嫩艾美耳球虫马杜霉素耐药虫株与敏感虫株进行杂交，并与敏感虫株回交，构建马杜霉素耐药基因渗入系虫株。借助基因组重测序技术与基因编辑技术，发现ETH2_0402100基因第1255位核苷酸存在多态性突变，其中C对应马杜霉素敏感表型，T对应马杜霉素耐药表型。基于田间样本的PCR鉴定结果，该SNP分子标记可准确检测马杜霉素耐药性，其结果与笼饲实验一致。发明提供了用于检测的引物及结合PCR技术筛选耐药虫株的方法，该方法操作简单、耗时短、成本低，可广泛应用于鸡球虫马杜霉素耐药性的临床检测与药物使用指导。
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公开(公告)号：CN112899167B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202110286834.3
申请日：2021-03-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于球虫耐药株诱导及获取技术领域，具体涉及一种与抗球虫药相关的模拟田间快速诱导耐药株试验及耐药株的分离鉴定方案。本发明所述模拟田间快速诱导抗球虫药耐药株的方法，通过设计前后两批快速诱导耐药株试验，能够在7周之内快速筛选出多株稳定的耐药虫株，进而在较短的时间内获得足够数量的耐药虫株。该试验在保证原始虫株背景清晰的情况下，能够快速筛选球虫耐药株，具有较高的时效性，满足后续深入分析所需要的样品数量，并且该方案在前后两种药物耐药株筛选的试验上均验证了该方法的可靠性，具有耗时短、操作简单，成本低的优势，可广泛应用于鸡球虫耐药株的试验诱导、筛选及鉴定。
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公开(公告)号：CN113025738A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110485754.0
申请日：2021-04-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于球虫耐药性检测技术领域，具体涉及一种与鸡艾美耳球虫常山酮耐药性相关的SNP分子标记，进一步公开一种鸡艾美耳球虫常山酮耐药性的位点突变检测试剂盒及检测方法。本发明方案通过将鸡球虫常山酮耐药株与敏感株基因组序列进行比对，发现位于球虫PRS基因第1852位的SNP位点，该SNP位点A对应于常山酮敏感，该SNP位点G对应常山酮耐药。经鸡球虫不同临床耐药虫株的验证，该SNP位点可用于区分鉴别常山酮耐药的鸡球虫和敏感的鸡球虫，具有较高的常山酮耐药性检测准确性，其鉴定结果与笼饲实验的鉴定结果一致，可作为常山酮耐药虫株筛选及检测的依据。
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公开(公告)号：CN106635980B
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201611022238.X
申请日：2016-11-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及生物细胞系，具体公开了一种自发永生化的绵羊外周血来源细胞系及其建立方法。具体为，采集成年健康绵羊的外周血，利用人外周血淋巴细胞分离液分离细胞后，进行细胞的培养与传代，传代过程中，通过对消化步骤的优化以及对培养基的优化，获得一种均一性高的自发永生化的绵羊外周血来源细胞系，该细胞系可表达绵羊的多种先天免疫受体，可用于细胞生物学、病原与宿主相互作用的体外研究。为促进绵羊健康养殖及疫病防控提供了很好的细胞学工具，为体外研究病原与绵羊的相互作用、评估药物或生物制品对绵羊的影响，更好的服务绵羊的健康养殖。
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公开(公告)号：CN107217040A
公开(公告)日：2017-09-29
申请号：CN201710459402.1
申请日：2017-06-16
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N5/10
CPC classification number: C12N5/0625 , C12N5/0679 , C12N2500/25 , C12N2501/11
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域，具体公开了一种永生化兔小肠上皮细胞系及其构建方法。采集新生兔的小肠，利用含有胶原酶和中性蛋白酶的酶消化液进行消化，消化后使用重悬离心和相差贴壁的方法对隐窝细胞团进行提纯，可获得高纯度的原代隐窝上皮细胞。这类隐窝上皮细胞可进行培养与传代。对获得的隐窝上皮细胞进行脂质体转染表达SV40大T抗原的质粒，再连续细胞传代最终筛选得到一株永生化兔小肠上皮细胞系。该永生化兔小肠上皮细胞系可同时表达肠上皮表面标志分子和隐窝基层干细胞的表面分子。所述肠上皮表面标志分子包括但不限于角蛋白8，E‑降钙素和ki67；所述隐窝基层干细胞的表面分子包括但不限于Lgr5，sox9。所述永生化兔小肠上皮细胞系可应用于建立兔小肠上皮体外模型，用于研究营养吸收机理，细胞通路挖掘，和病原体体外培养等方向。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104940924A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510291026.0
申请日：2015-05-29
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: Y02A50/489
Abstract: 本发明提供了一种球虫佐剂，所述球虫佐剂包括顶复门真球虫目原虫和/或其提取物。相比于传统的油乳佐剂，本发明的球虫佐剂可以使疫苗产生的免疫效果提高两个抗体滴度，而且能够诱导对预防病毒及其它胞内病原体感染更为有效的Th1型和CTL型细胞免疫应答。
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公开(公告)号：CN104897891A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201410081706.5
申请日：2014-03-06
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6866 , G01N33/56905
Abstract: 本发明提供了一种弓形虫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：弓形虫抗原、IFN-γ捕获抗体、IFN-γ标准品、生物素标记的IFN-γ检测抗体、细胞培养基、阳性对照物、阴性对照物、包被液、封闭液、HRP标记的链霉亲和素、显色液和终止液。本发明试剂盒具有高度的敏感性和特异性，克服了现有的弓形虫抗体检测试剂盒所常见的检出率差、误诊率高的缺点。
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公开(公告)号：CN104830882A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201410046883.X
申请日：2014-02-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种表达鸡IgY分子Fc片段和禽流感病毒抗原的融合基因及其应用，其是利用禽流感病毒H9N2亚型的HA1基因片段和鸡IgY分子Fc基因片段构建得到融合基因，并将融合基因转染到和缓艾美耳球虫中得到转基因球虫，通过口服方式接种转基因球虫来提高鸡群针对禽流感特异性抗原的免疫反应。该应用使用简单，成本低廉，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN102140451A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201110009255.0
申请日：2011-01-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种从原核或真核生物来源材料中提取DNA或RNA的方法。本发明包括如下步骤：1)预处理：用液氮研磨法、移液器吸头反复吹吸法或玻璃珠研磨法裂解原核或真核生物材料，然后用去污剂进行溶解处理，得到裂解消化产物；2)将饱和食盐水加入裂解消化产物，对生物材料中的蛋白进行沉淀处理；3)分离沉淀相和液相，然后对液相中DNA或RNA进行分离和纯化。与现有技术相比，本发明的优点在于：1)使用无毒试剂；2)提取方法简便快捷；3)得到的DNA或RNA质量高，完全适用于下游分子生物学实验；4)成本低廉。
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公开(公告)号：CN110694058A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911103111.4
申请日：2019-11-12
Applicant: 中国农业大学
IPC: A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明涉及动物球虫病疫苗技术领域，具体涉及一种兔球虫病活疫苗及其制备方法和应用。本发明提供一种兔球虫病活疫苗组合物，其包含大型艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和中型艾美耳球虫的早熟致弱虫株以及穿孔艾美耳球虫的早熟致弱虫株。本发明提供的兔球虫病活疫苗同时具有较高的免疫保护效力和安全性，能够有效防治兔球虫病，减少或杜绝抗球虫药物的使用，同时显著降低疫苗接种对于兔体重增重等生长和生产性能的不利影响，具有良好的经济效益和广阔的应用前景。本发明还提供球虫早熟致弱虫株的选育方法，该方法能够有效缩短早熟虫株的选育周期，提高球虫早熟致弱虫株的选育效率，获得的早熟虫株的遗传特性稳定、致病性显著降低、免疫原性良好。
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