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公开(公告)号：CN108866041A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810678971.X
申请日：2018-06-27
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种番石榴叶际微生物基因组DNA的提取方法，包括以下步骤：(1)将液氮中保存的番石榴叶片加入磷酸缓冲液中，再加无菌石英砂和玻璃珠，震荡后超声处理，离心得到含叶际微生物的混合液；(2)向含叶际微生物的混合液再加TENP溶液，反复冻融处理后，加入溶菌酶和蛋白酶K，水浴，再加入SDS缓冲液，水浴，离心处理后得到沉淀a与上清液a；(3)向上清液a中加入氯仿与异戊醇，离心得到沉淀b与上清液b；(4)向上清液b中加入PEG8000沉淀剂，冷冻保存后离心得到沉淀c与上清液c；(5)将沉淀c用乙醇洗涤，离心冷冻干燥后即得到番石榴叶际微生物基因组DNA。本发明方法简单、提取率高，具有广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号：CN106399336B
公开(公告)日：2017-12-05
申请号：CN201610771314.0
申请日：2016-08-30
Applicant: 中南大学湘雅二医院
Abstract: 本发明提供一种高表达人GAD65蛋白的基因序列和蛋白制备方法,真核宿主为果蝇S2细胞。通过探讨密码子使用种属偏好性，对人GAD65的原始基因序列进行密码子优化，得到一个可提高重组蛋白表达效率的全新GAD65基因序列，如SEQ NO.1所示。本发明提供了承载人全新GAD65序列的果蝇细胞高表达载体，包含如SEQ NO.1所示的GAD65基因序列。GAD65含有StrepII标签，通过一步亲和层析纯化即可获得高纯度、高免疫原性的GAD65蛋白，大大提高了重组蛋白的得率并降低了成本。本发明改变了传统的用酵母或昆虫杆状病毒表达系统获得人GAD65的方法，首次利用果蝇S2细胞这一高密度连续培养体系大量表达GAD65，通过StrepII标签快速制备高纯度、低成本并具有良好免疫原性的人GAD65蛋白。
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公开(公告)号：CN116218982A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202210814048.0
申请日：2022-07-12
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病(FT1D)诊断标志物的应用。FT1D患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa_circRNA_100632水平显著增高，与1型糖尿病患者及正常对照具有显著性差异，临床上可以作为诊断性生物标志物用于对FT1D患者诊断及鉴别诊断。并且，上调hsa_circRNA_100632水平可以构建FT1D的模型。
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公开(公告)号：CN111560430B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202010555343.X
申请日：2020-06-17
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学和医学领域，涉及一种检测rs1766位点多态性的试剂及其应用。通过该位点基因型的检测结果来预测1型糖尿病(T1DM)、成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)或2型糖尿病(T2DM)的患病风险。本发明还公开了相应的检测试剂盒，该试剂盒含有扩增rs1766位点的引物以及检测该位点基因型的测序引物。利用本发明检测rs1766位点的基因型，方法简单易行,快速高效，成本低廉,为糖尿病的诊断和治疗提供了一个简捷的新途径。
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公开(公告)号：CN111518894B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202010555270.4
申请日：2020-06-17
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明属于分子生物学和医学领域，涉及一种检测rs9273471位点多态性的试剂及其应用。通过该位点基因型的检测结果来预测成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患病风险或者预测区分LADA和2型糖尿病(T2DM)。本发明还公开了相应的检测试剂盒，该试剂盒含有扩增rs9273471位点的引物以及检测该位点基因型的引物。利用本发明检测rs9273471位点的基因型，方法简单易行,快速高效，成本低廉,为LADA的诊断和治疗提供了一个简捷的新途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109097319B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201810803117.1
申请日：2018-07-20
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶悬浮细胞的培养方法，包括以下步骤：(1)采集番石榴成熟叶片，洗净后进行表面灭菌处理，切块得到外植体；(2)将外植体接种至愈伤组织诱导培养基中进行诱导培养得到愈伤组织；(3)将愈伤组织接种至愈伤组织增殖培养基中进行继代培养得到增殖愈伤组织；(4)将增殖愈伤组织接种至液体培养基中进行继代培养，培养过程中保持振荡，继代培养更换培养液时，用吸管取出单细胞或小细胞团进行下一代振荡培养；最终得到只含有单细胞或小细胞团的培养物，将这些培养物混匀即得到番石榴叶悬浮细胞。本发明还提供一种上述番石榴叶悬浮细胞的应用。本发明的方法具有生产成本低、生产周期短、生产效率高等优点。
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公开(公告)号：CN108759317A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810415276.4
申请日：2018-05-03
IPC: F26B5/06
CPC classification number: F26B5/06
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶的真空冷冻干燥方法，包括如下步骤：(1)将番石榴叶片清洗干净，去除杂质，进行微波真空干燥；(2)冷冻至‑35℃，进行真空冷冻干燥，直至物料温度曲线与加热板温度曲线平行时结束；(3)碎过筛，真空包装。本发明的干燥方法，相较于传统的晒干、阴干、冷冻干燥、鼓风干燥，在冻干过程中，微生物的生长和酶的作用无法进行，因此能保持原来的性状，使叶片保留原有的色泽；在低温下干燥时，物质中的一些挥发性成分损失较少，能够有效保留叶片中的有效成分；真空度和搁板加热温度可精确控制，可保持样品性状、复溶性好。
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公开(公告)号：CN108669266A
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201810415278.3
申请日：2018-05-03
IPC: A23F3/34 , A61K36/8945 , A61K36/9066 , A61P3/10 , A61P3/06 , A61P9/12 , A61K31/702
CPC classification number: A23F3/34 , A61K31/702 , A61K36/488 , A61K36/605 , A61K36/61 , A61K36/70 , A61K36/752 , A61K36/815 , A61K36/8945 , A61K36/9066 , A61P3/06 , A61P3/10 , A61P9/12 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶保健茶，原料包括以下质量份数的各组分：番石榴叶10‑25份，黄姜片1‑5份，苦荞麦0.5‑2份，地骨皮5‑20份，葛根1‑4份，桑叶2‑8份，陈皮1‑4份，枸杞5‑15份，丹参3‑9份，知母1‑3份，当归4‑10份和低聚果糖15‑30份。该产品在成本降低的同时，能保证降血糖的功效和口味。本发明还公开了制备方法，包括如下步骤：称取桑叶、陈皮、地骨皮、丹参、知母和番石榴叶晒干，磨碎得到粉末过筛，加入纯水后进行超声处理，滤去滤渣后冷冻至‑35℃以下，进行真空冷冻干燥，得到粉末状固体；称取当归、黄姜片、苦荞麦、葛根和枸杞切碎，将低聚果糖用纯水溶解后均匀喷入其中，干燥后与粉末状固体分装成茶包。该制备方法，操作简单，制作成本低，便于大规模加工生产。
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公开(公告)号：CN108553515A
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201810415272.6
申请日：2018-05-03
IPC: A61K36/61 , A61K9/48 , A61P3/10 , A61K127/00
Abstract: 本发明公开了一种消渴降糖胶囊的制备方法，包括如下步骤：(1)将番石榴叶洗净后烘干、粉碎成粉末后过筛；(2)取得到的番石榴叶粉末，通过超声波-微波联合辅助提取，经纱布过滤去除残渣收集提取液；(3)将收集到的提取液采用大孔吸附树脂柱进行吸附，依次用水、乙醇洗柱，得到乙醇洗脱液；(4)将乙醇洗脱液进行减压浓缩、干燥，得到的粉末装入胶囊壳，即得到所述的消渴降糖胶囊。本发明的制备方法，比传统热水浸提具有耗时短、效率高等优势，由超声波、微波技术协同作用，其超声和微波功率、时间、温度都为可控状态，有效提高番石榴叶中有效成分的收率；制备得到的消渴降糖胶囊工艺稳定，产品性状稳定，质量可控，具有良好的降血糖效果。
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公开(公告)号：CN108866041B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201810678971.X
申请日：2018-06-27
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种番石榴叶际微生物基因组DNA的提取方法，包括以下步骤：(1)将液氮中保存的番石榴叶片加入磷酸缓冲液中，再加无菌石英砂和玻璃珠，震荡后超声处理，离心得到含叶际微生物的混合液；(2)向含叶际微生物的混合液再加TENP溶液，反复冻融处理后，加入溶菌酶和蛋白酶K，水浴，再加入SDS缓冲液，水浴，离心处理后得到沉淀a与上清液a；(3)向上清液a中加入氯仿与异戊醇，离心得到沉淀b与上清液b；(4)向上清液b中加入PEG8000沉淀剂，冷冻保存后离心得到沉淀c与上清液c；(5)将沉淀c用乙醇洗涤，离心冷冻干燥后即得到番石榴叶际微生物基因组DNA。本发明方法简单、提取率高，具有广阔的市场应用前景。
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