公开(公告)号：CN106755444A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611266452.X

申请日：2016-12-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 赵雪 ,  李冬梅 ,  战宇航 ,  朱治佳 ,  韩英鹏 ,  李文滨

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2537/16 ,  C12Q2545/101

Abstract: 本发明提供一种大豆基因拷贝数变异分析方法，包括以下步骤：1)基因组DNA的提取和浓度均一化；2)被测基因引物设计；3)以β‑actin为内参基因，用内参基因引物与步骤2)涉及的被测基因引物分别对基因组DNA模板进行荧光定量PCR反应；4)利用RT‑qPCR获得被测基因和内参基因β‑actin的Ct值计算被测基因在不同大豆品种中的相对丰度值，通过被测基因在不同大豆品种中的相对丰度值之间的比值判断被测基因在不同品种大豆中的拷贝数变异关系。本方法基因组DNA用量较高通量测序、微阵列法和原位杂交技术用量少103倍；无需进行测序和杂交探针合成，成本低廉、操作简单、可实现大样本分析。

公开(公告)号：CN103320427A

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201210073913.7

申请日：2012-03-20

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 赵雪 ,  滕卫丽 ,  韩英鹏 ,  李文滨 ,  李永光 ,  李冬梅 ,  朱聃

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种辅助鉴定大豆对大豆花叶病毒抗性的方法。本发明保护序列表的序列1所示DNA片段和序列表的序列2所示DNA片段组成的引物对甲。所述引物对甲具有如下(a)或(b)中的应用：(a)辅助鉴定大豆对大豆花叶病毒的抗性；(b)辅助筛选抗大豆花叶病毒的大豆。采用本发明的方法，可以实现对大豆花叶病毒SMV-N1株系和SMV-N3株系抗性种质的分子辅助选择育种，与传统的抗病表型鉴定相比，可以实现早期选育(如子叶期)，选择效率达到98％以上，并大大节省实验时间和实验成本。本发明将在大豆育种中发挥重要作用。

公开(公告)号：CN100523210C

公开(公告)日：2009-08-05

申请号：CN200610010079.1

申请日：2006-05-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张永忠 ,  孙艳梅 ,  许晶 ,  井乐刚 ,  李冬梅

IPC: C12P17/06

Abstract: 本发明提供的是一种酶水解大豆异黄酮生产染料木黄酮和黄豆苷元的方法。以不同纯度的大豆异黄酮粉为原料，应用里氏木酶β-葡萄糖苷酶或大豆β-葡萄糖苷酶中的一种进行水解，再对水解液进行溶剂萃取、超滤及冷冻离心分离纯化，得到染料木黄酮和黄豆苷元。本发明的方法可以使用不同纯度的水解原料。本发明使用的酶是可以直接购买的商品化酶，也可以是自行制备的酶。所用的酶的缓冲溶液可以循环使用。本发明易于操作，转化率较高(＞85%)，产品大豆异黄酮苷元总含量较高。使用从东北大豆中自行提取纯化的大豆β-葡萄糖苷酶可以克服微生物发酵制酶，食用安全性差的问题，可以使产品更加安全。使用商品化的酶，可以降低生产成本。因此，本发明的方法更适合于工业化生产。

公开(公告)号：CN1884568A

公开(公告)日：2006-12-27

申请号：CN200610010079.1

申请日：2006-05-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张永忠 ,  孙艳梅 ,  徐晶 ,  井乐刚 ,  李冬梅

IPC: C12P17/06

Abstract: 本发明提供的是一种酶水解大豆异黄酮生产染料木黄酮和黄豆苷元的方法。以不同纯度的大豆异黄酮粉为原料，应用里氏木酶β－葡萄糖苷酶或大豆β－葡萄糖苷酶中的一种进行水解，再对水解液进行溶剂萃取、超滤及冷冻离心分离纯化，得到染料木黄酮和黄豆苷元。本发明的方法可以使用不同纯度的水解原料。本发明使用的酶是可以直接购买的商品化酶，也可以是自行制备的酶。所用的酶的缓冲溶液可以循环使用。本发明易于操作，转化率较高(＞85％)，产品大豆异黄酮苷元总含量较高。使用从东北大豆中自行提取纯化的大豆β－葡萄糖苷酶可以克服微生物发酵制酶，食用安全性差的问题，可以使产品更加安全。使用商品化的酶，可以降低生产成本。因此，本发明的方法更适合于工业化生产。