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公开(公告)号:CN105925596A
公开(公告)日:2016-09-07
申请号:CN201610099711.8
申请日:2016-02-23
Applicant: 上海交通大学 , 美国杰科实验室有限公司 , 杰科(天津)生物医药有限公司
CPC classification number: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/63 , C07K14/00 , C07K2319/33 , C07K2319/55 , C07K2319/92
Abstract: 本发明涉及一种生物技术领域的基于内含肽的药用重组蛋白的合成方法,包括如下步骤:构建表达免疫毒素中具有导向功能的多肽和具有毒性功能的多肽的载体DNA片段,将所述两种多肽的载体DNA片段与内含肽的N端或C端分别连接,形成融合表达载体;取步骤一所述的融合表达载体,表达,得到融合内含肽N端的融合多肽A以及融合内含肽C端的融合多肽B;取融合多肽A和融合多肽B,混合,在内含肽对应的反式剪接条件下,诱导,得到免疫毒素。本发明的方法只需要制备不同的导向部分多肽以及毒性部分多肽,就可以将其进行组合,进而产生可以针对不同靶点及拥有不同毒性机制的免疫毒素,具有显著的多样性及灵活性。
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公开(公告)号:CN106701823A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201710037930.8
申请日:2017-01-18
Applicant: 上海交通大学 , 美国杰科实验室有限公司 , 杰科(天津)生物医药有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10 , C07K16/44
CPC classification number: C12N15/85 , C07K16/44 , C07K2317/51 , C07K2317/515 , C12N15/113 , C12N2310/10 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种生产无岩藻糖单克隆抗体的CHO细胞系建立及其应用;利用CRISPR/Cas9技术编码CHO细胞的FUT8基因,得到FUT8基因沉默的稳定FUT8基因缺失的CHO细胞株(简称FUT8‑/‑细胞株)。通过对FUT8‑/‑细胞表达的抗体的理化性质及生物活性检测:糖型检测结果表明FUT8‑/‑细胞表达的单克隆抗体的岩藻糖完全消除,以野生型CHO细胞表达的含岩藻糖的单克隆抗体为对照,完全无岩藻糖抗体与FcγRIIIa抗原亲和力提高7倍,ADCC效应提高25倍。
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公开(公告)号:CN105884859A
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201610281661.5
申请日:2016-04-29
Applicant: 上海交通大学 , 美国杰科实验室有限公司 , 杰科(天津)生物医药有限公司
CPC classification number: C07K1/30 , C07K1/165 , C07K14/5409
Abstract: 本发明涉及一种分离、纯化重组蛋白的方法。该方法包括:在大肠杆菌系统表达目的蛋白的包涵体,用PEG沉淀法对变性包涵体进行纯化后,再进行变性、复性过程,并进一步采用色谱纯化技术,最终获得高纯度、高活性的重组蛋白产品。该方法提供了一种快速、低成本、高质量的重组蛋白的分离纯化方法。本发明提供的方法可用于表达、纯化生物大分子目的蛋白,具体包括细胞因子、酶、抗菌肽、抗体或抗体片段,尤其包括人IL?15。本发明操作简便,成本低,可应用于大规模的工业生产。
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