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公开(公告)号：CN110973066A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911235866.X
申请日：2019-12-05
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明公开了松材线虫病疫木内腐生线虫的培养基及其制备方法和应用，属于腐生线虫培养技术领域。该腐生线虫培养基的配方为：松树木屑20-30g/L、葡萄糖10-20g/L、琼脂20-30g/L，培养基经高压蒸汽灭菌冷却凝固后，接种腐生线虫，培养箱中25℃培养10天以上，收集腐生线虫。其中，松树木屑为能够分离到腐生线虫的原松属树种木质部的木屑。相比于长满灰葡萄孢的PDA培养基培养腐生线虫，需花费22-30天的时间才能获得大量的线虫，本发明缩短了一半以上的培养时间，加快了腐生线虫室内培养的速度，提高了培养效率；且本发明培养基配置步骤简单，所需原料易获得且价格低廉，容易实现大规模的生产与使用。
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公开(公告)号：CN110731223A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911124409.3
申请日：2019-11-15
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种盐胁迫下促进金丝柳生长的方法，属于植物盐胁迫生长研究技术领域。本发明提供的盐胁迫下促进金丝柳生长方法，首先通过在液体培养基中培养耐盐根际促生菌JYZ-SD2，得到促进植物耐盐生长的微生物菌剂，再将其浇灌金丝柳，可促进金丝柳在盐胁迫下生长。对金丝柳扦插苗进行含耐盐根际促生菌JYZ-SD2的微生物菌剂处理，随后进行盐胁迫，试验结果表明，其苗高、地径以及叶绿素含量均要高于对照，最高分别可达10.7％、13.15％和37.99％，表明本发明所提供的方法具有非常显著的在盐胁迫下促进金丝柳生长的作用，在开发利用盐碱地植树造林等领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN110656068A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201911056441.2
申请日：2019-10-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种吡咯伯克霍尔德氏菌形成生物膜的方法，包括以下步骤：1)采用LB固体平板活化吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌种，获得单菌落，挑取单菌落进入LB液体培养基，180r/min，28℃纯培养24h，获得菌悬液；2)配置供试培养基TMG，在TSB培养基中加入1％v/v甘油和25mM MgSO4，pH 5-7；3)将菌悬液1％v/v接种至TMG液体培养基，180r/min，28℃纯培养24h取出后静置4-6天，形成生物膜。本发明配置了一种可诱导JK-SH007形成生物膜的培养基TMG，JK-SH007经过该培养基培养后，可形成肉眼可见的生物膜，使得其在营养匮乏的环境下更好的存活。
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公开(公告)号：CN108949632A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810876219.6
申请日：2018-08-02
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱抗病促生作用的解淀粉芽孢杆菌YH‑20及其应用，该菌株分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyloliquefaciens)YH‑20，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2018361，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2018年06月11日。本发明的解淀粉芽孢杆菌YH‑20对10种植物病原真菌均具有较好的拮抗效果，且对植物本身没有危害，可以明显的促进植物的生长。利用本发明所提供的解淀粉芽孢杆菌菌株YH‑20可以代替部分农药及化肥的施用。可以有效地保护生态环境以及保护林业树木的生产。
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公开(公告)号：CN108660183A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810734443.1
申请日：2018-07-05
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种快速筛选杀松材线虫细菌的方法，先将无菌松材线虫悬浮液与待测细菌菌株培养液在96孔板中共培养，然后离心，去除上清，再加入无菌水与线虫共培养，然后统计被击倒的线虫数量，根据被击倒的线虫数量来判断细菌是否是杀松材线虫细菌。本发明的快速筛选杀松材线虫细菌方法，经过多个细菌菌株、多次重复结果表明，采用该方法对杀松材线虫进行筛选，准确率高，是一种快速且准确的杀线虫细菌筛选方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108220253A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201710927229.3
申请日：2017-10-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N7/02
Abstract: 本发明公开了一种分离松材线虫体内病毒的方法，包括：大量培养松材线虫；收集松材线虫；将松材线虫虫液反复冻融后用玻璃匀浆器匀浆；用细菌过滤器将松材线虫匀浆过滤；低速离心，获得粗提液，再用PEG进行沉淀，然后用蔗糖密度梯度超速离心，分层收集样品，再去蔗糖，即可获得松材线虫病毒粗提物。本发明的分离松材线虫体内病毒的方法，利用反复冻融裂解细胞，再经匀浆器匀浆，将病毒颗粒从松材线虫体内释放出来，采用细菌过滤器过滤和低速离心，去除大的细胞碎片，通过PEG沉淀收集病毒沉淀物，进而用蔗糖密度梯度超速离心，分层收集离心产物，再去蔗糖后获得松材线虫病毒粗提物，是一种简易且成功的方法。
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公开(公告)号：CN107988186A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711273657.5
申请日：2017-12-06
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种冷适应性内切β-1,4-葡聚糖酶及其表达基因和应用，所述的冷适应性内切β-1,4-葡聚糖酶的氨基酸序列如 SEQ ID NO.1所示，其表达基因的核苷酸序列如 SEQ ID NO.3所示。本发明采用PCR技术从Burkholderia pyrrocinia JK-SH007的总DNA中扩增内切葡聚糖酶基因片段，原核表达并纯化得到内切β-1,4-葡聚糖酶。通过对内切β-1,4-葡聚糖酶酶学分析表明：内切β-1,4-葡聚糖酶基因对羧甲基纤维素的最适反应温度为35℃，与报道的同类酶相比最适温度下降了10-20℃。最适pH为6.0，该酶在30-45℃和中性环境下较稳定，是一种具有良好工业应用价值的冷适应酶，将该酶运用于生物质能源领域将有利于降低其成本，进而实现同步发酵，且对阐释内切β-1,4-葡聚糖酶的相关生物学功能也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN107593454A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201711068986.6
申请日：2017-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种抗松材线虫病马尾松体细胞胚胎发生和植株再生方法，以抗松材线虫病马尾松未成熟合子胚为材料，经胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织的增殖与维持、分化成熟以及萌发，并对体细胞胚进行生根诱导、再生植株进行壮苗培养以及驯化移栽，最终获得抗松材线虫病马尾松植株。本发明的抗松材线虫病马尾松体细胞胚胎发生和植株再生方法，以抗性马尾松未成熟合子胚为材料，初步建立了抗性马尾松体细胞胚胎发生再生体系，对抗性马尾松胚性愈伤组织诱导进行优化，进一步研究了体细胞胚增殖、分化、萌发、再生植株移栽驯化等重要环节，培育出小批量的抗病马尾松悬浮培养及体细胞胚胎发生再生植株，为抗性马尾松的工厂化生产奠定了良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN107099578A
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201710443811.2
申请日：2017-06-13
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种微量抽测植物悬浮培养细胞液浓度的方法，包括：1）微量抽测获得细胞液中染色细胞的面积数据，2）染色细胞面积与细胞液浓度的标准曲线，3）建立抗性赤松13‑1悬浮继代培养的生长模型。本发明的微量抽测植物悬浮培养细胞液浓度的方法，采用微量抽测的方式测量细胞液浓度，每次仅需吸取0.1mL的待测细胞液，控制无菌的条件下该细胞液仍可继续培养增殖；本方法使用Image‑Pro Plus软件进行计数，可批量处理数据节约时间和减少人工判断误差。
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公开(公告)号：CN106799394A
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201710065331.7
申请日：2017-01-23
IPC: B09C1/08
Abstract: 本发明属于生物技术领域，特别涉及嗜铁素在降低土壤重金属浓度中的应用。将嗜铁素用于降低土壤中的重金属浓度，发现其对重金属有螯合作用，特别是对铜、铬、锌三种重金属的螯合效果最佳，重金属的降低率分别达到了84.54％、95.20％、82.89％。
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