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公开(公告)号：CN104845972A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510259660.6
申请日：2015-05-20
申请人： 黑龙江大学
IPC分类号： C12N15/113
摘要： 副干酪乳杆菌HD1.7prcK基因siRNA，它涉及副干酪乳杆菌基因的siRNA分子。它解决构建自杀质粒难度大，同源臂的长短依赖目的基因的长短，不利于同源重组的发生等问题。siRNA-K1核苷酸序列为5'-GCAACGCUCCAACUUUCAUTT-3'。siRNA-K2核苷酸序列为5'-CCAACUUUCAUUGCAACAATT-3'。本发明的两种siRNA分子都能够高效的阻断副干酪乳杆菌HD1.7prcK基因的表达，从而降低副干酪乳杆菌HD1.7细菌素的产量。
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公开(公告)号：CN104845972B
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201510259660.6
申请日：2015-05-20
申请人： 黑龙江大学
IPC分类号： C12N15/113
摘要： 副干酪乳杆菌HD1.7prcK基因siRNA，它涉及副干酪乳杆菌基因的siRNA分子。它解决构建自杀质粒难度大，同源臂的长短依赖目的基因的长短，不利于同源重组的发生等问题。siRNA‑K1核苷酸序列为5'‑GCAACGCUCCAACUUUCAUTT‑3'。siRNA‑K2核苷酸序列为5'‑CCAACUUUCAUUGCAACAATT‑3'。本发明的两种siRNA分子都能够高效的阻断副干酪乳杆菌HD1.7prcK基因的表达，从而降低副干酪乳杆菌HD1.7细菌素的产量。
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公开(公告)号：CN103589744A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310572456.0
申请日：2013-11-15
申请人： 黑龙江大学
摘要： 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT由prcR基因左侧片段prcRL、prcR基因右侧片段prcRR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcRL；二、得到质粒pUC18-RL；三、扩增片段prcRR；四、得到质粒pUC18-RLRR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT。本发明用于生物工程研究领域。
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公开(公告)号：CN105755031A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610157858.8
申请日：2016-03-18
申请人： 黑龙江大学
CPC分类号： C12N9/1205 , C12Y207/01037
摘要： 高产细菌素的副干酪乳杆菌基因工程菌株的构建方法，涉及一种副干酪乳杆菌基因工程菌株的构建方法。本发明是要解决现有副干酪乳杆菌的细菌素产量低的问题。方法：一、从副干酪乳杆菌HD1.7中扩增prcK基因；二、构建质粒pMD18?T?prcK；三、构建重组过表达载体pRSFDuet?1?prcK；四、构建重组过表达载体pRR?tet；五、将过表达载体pRR?tet电转化副干酪乳杆菌HD1.7感受态细胞；六、prcK基因过表达突变株的筛选和鉴定。该基因工程菌株的抑菌能力比原始菌株提高了17.86％。传代后发酵液细菌素效价2373.46±46.27AU/mL，传代后效价比较稳定。本发明用于产细菌素。
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公开(公告)号：CN103589744B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310572456.0
申请日：2013-11-15
申请人： 黑龙江大学
摘要： 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT由prcR基因左侧片段prcRL、prcR基因右侧片段prcRR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcRL；二、得到质粒pUC18-RL；三、扩增片段prcRR；四、得到质粒pUC18-RLRR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT。本发明用于生物工程研究领域。
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公开(公告)号：CN103614408A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310572458.X
申请日：2013-11-15
申请人： 黑龙江大学
摘要： 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT由prcK基因左侧片段prcKL、prcK基因右侧片段prcKR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcKL；二、得到质粒pUC18-KL；三、扩增片段prcKR；四、得到质粒pUC18-KLKR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT。本发明用于生物工程研究领域。
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公开(公告)号：CN104845971B
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201510259659.3
申请日：2015-05-20
申请人： 黑龙江大学
IPC分类号： C12N15/113
摘要： 副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因siRNA，它涉及副干酪乳杆菌基因的siRNA分子。它解决构建自杀质粒难度大，同源臂的长短依赖目的基因的长短，不利于同源重组的发生等问题。siRNA‑R1核苷酸序列为5'‑AUACCCAACAUUGUUUCGCTT‑3'。siRNA‑R2核苷酸序列为5'‑AUGCAGAACGCGAAAUCGCTT‑3'。本发明的两种siRNA分子都能够高效的阻断副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因的表达，从而降低副干酪乳杆菌HD1.7细菌素的产量。
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公开(公告)号：CN103614408B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310572458.X
申请日：2013-11-15
申请人： 黑龙江大学
摘要： 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT由prcK基因左侧片段prcKL、prcK基因右侧片段prcKR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcKL；二、得到质粒pUC18-KL；三、扩增片段prcKR；四、得到质粒pUC18-KLKR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT。本发明用于生物工程研究领域。
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公开(公告)号：CN104845971A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510259659.3
申请日：2015-05-20
申请人： 黑龙江大学
IPC分类号： C12N15/113
摘要： 副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因siRNA，它涉及副干酪乳杆菌基因的siRNA分子。它解决构建自杀质粒难度大，同源臂的长短依赖目的基因的长短，不利于同源重组的发生等问题。siRNA-R1核苷酸序列为5'-AUACCCAACAUUGUUUCGCTT-3'。siRNA-R2核苷酸序列为5'-AUGCAGAACGCGAAAUCGCTT-3'。本发明的两种siRNA分子都能够高效的阻断副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因的表达，从而降低副干酪乳杆菌HD1.7细菌素的产量。
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