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公开(公告)号:CN117660544A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311667175.3
申请日:2023-12-06
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/0275
Abstract: 本发明公开了一种基于受精卵卵壳软化的大黄鱼高效基因组编辑方法,包括以下步骤:首先获取大黄鱼自然受精的受精卵,利用5mg/ml的链霉蛋白酶在24℃水温下消化受精卵30min以使卵壳软化,将Cas9蛋白、sgRNA及酚红混合,采用显微注射方法,将混合物注射入胚盘期受精卵中,孵化48h后,可以获得存活率64%,外源靶基因突变率最高达86.3%。本发明第一次利用卵壳软化的方法在海水鱼中建立了基因组编辑方法,相比于以往的基因组编辑方法,该基因组编辑方法不仅操作简单,而且可大大提高基因组编辑受精卵的孵化率和基因组编辑效率,为开展大黄鱼基因的功能研究和大黄鱼遗传改良提供了新的技术手段。