公开(公告)号：CN105524941A

公开(公告)日：2016-04-27

申请号：CN201610035065.9

申请日：2016-01-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 高波 ,  王赛赛 ,  王亚丽 ,  沈丹 ,  薛松磊 ,  宋成义 ,  崔恒宓 ,  王克华 ,  黎寿丰

IPC: C12N15/85

CPC classification number: C12N15/8509 ,  A01K2267/02 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/60 ,  C12N2800/90 ,  C12N2830/008

Abstract: 本发明提供了一种特异于禽类原始生殖细胞的基因转移系统和方法。该基因转移系统包括含有具有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列的vasa启动子的转座酶辅助质粒。该基因转移方法包括：(1)使用生物工程方法，构建含有vasa启动子或者含有vasa启动子和通用增强子元件的转座酶辅助质粒；(2)使用生物工程方法，构建含有需要转移的目的基因表达盒的转座子供体质粒；(3)提取质粒后，将上述转座子供体质粒和转座酶质粒按1:2比例混合均匀，调整其终浓度为500ng—1.5μg/μL；(4)将步骤(3)中所得的混合质粒使用包埋剂包裹后，转染禽类早期胚胎血液中PGCs细胞。通过本发明，可以实现外源基因在禽类胚胎PGCs基因组中高效特异整合，从而达到提高转基因禽的制备效率的目的。