一种表达非洲猪瘟病毒EP402R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108504687A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810265019.7

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP402R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。本发明提供一种表达EP402R基因重组腺病毒质粒pAD-EP402R,以pAD-EF1α-GFP腺病毒表达载体为基础,在多克隆位点处引入EP402R基因。本发明还提供了表达EP402R基因的重组腺病毒的制备方法,利用构建得到的pAD-EP402R质粒与腺病毒包装体系PEI混合,实现腺病毒包装过程,得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了EP402R基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究表达EP402R基因重组腺病毒载体候选疫苗奠定基础。

    一种表达非洲猪瘟病毒CP204L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108441514A

    公开(公告)日:2018-08-24

    申请号:CN201810263671.5

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒CP204L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-CP204L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了CP204L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达CP204L的腺病毒载体疫苗奠定基础。

    一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用

    公开(公告)号:CN113462654B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202110937064.4

    申请日:2021-08-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用,属于单克隆抗体技术领域。本发明针对肝螺杆菌CdtB蛋白检测空白的问题,用具有良好免疫原性的肝螺杆菌CdtB第19位至273位氨基酸区域经重组表达免疫动物,筛选得到分泌肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D9,保藏编号为CCTCCNO:C2021140。杂交瘤细胞株2D9分泌的肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体可特异性结合肝螺杆菌CdtB蛋白,具具有亲和力高、特异性好的特点,且为小鼠IgG1亚型,为利用免疫学检测方法检测或诊断肝螺杆菌的感染提供了基础,为肝螺杆菌相关疾病的研究、新型诊断试剂的研制提供有力的研究基础。

    一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN107227374A

    公开(公告)日:2017-10-03

    申请号:CN201710646881.8

    申请日:2017-08-01

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/686 C12Q2563/107 C12Q2545/114

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法,属于分子生物学技术领域。本发明提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增,并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌,特异性达100%。本发明还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法,所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在,操作简便,无需进行琼脂糖凝胶电泳,只需荧光定量PCR仪即可完成,实现快速、大通量诊断和检测,降低了鉴别时间和检测成本,研究表明本发明提供的这一荧光PCR检测方法,灵敏度达30拷贝。

    一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用

    公开(公告)号:CN113462654A

    公开(公告)日:2021-10-01

    申请号:CN202110937064.4

    申请日:2021-08-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用,属于单克隆抗体技术领域。本发明针对肝螺杆菌CdtB蛋白检测空白的问题,用具有良好免疫原性的肝螺杆菌CdtB第19位至273位氨基酸区域经重组表达免疫动物,筛选得到分泌肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D9,保藏编号为CCTCCNO:C2021140。杂交瘤细胞株2D9分泌的肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体可特异性结合肝螺杆菌CdtB蛋白,具具有亲和力高、特异性好的特点,且为小鼠IgG1亚型,为利用免疫学检测方法检测或诊断肝螺杆菌的感染提供了基础,为肝螺杆菌相关疾病的研究、新型诊断试剂的研制提供有力的研究基础。

    一种表达非洲猪瘟病毒E183L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108531511A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810263672.X

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒E183L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。本发明提供一种表达E183L基因重组腺病毒质粒pAD-E183L,以pAD-EF1α-GFP腺病毒表达载体为基础,在多克隆位点处引入E183L基因。本发明还提供了表达E183L基因的重组腺病毒的制备方法,利用构建得到的pAD-E183L质粒与腺病毒包装体系PEI混合,实现腺病毒包装过程,得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了E183L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究表达E183L基因重组腺病毒载体候选疫苗奠定基础。

    一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108504686A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810263508.9

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体 pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-EP153R。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染 HEK293 细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了EP153R基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达EP153R的腺病毒载体疫苗奠定基础。

    一种表达非洲猪瘟病毒B646L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108342414A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810263507.4

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒B646L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-B646L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了B646L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达B646L的腺病毒载体疫苗奠定基础。

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