公开(公告)号：CN107190100A

公开(公告)日：2017-09-22

申请号：CN201710647055.5

申请日：2017-08-01

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  谢灵志 ,  袁燕 ,  孙靖谕 ,  钱淼 ,  于宁 ,  曹舒扬

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/113

Abstract: 本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分：上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH2O；程序包括：95℃30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。与常规PCR相比，本发明的方法的灵敏度提高了1000倍。

公开(公告)号：CN104388575B

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201410758583.4

申请日：2014-12-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  谭海明 ,  蔡骁垚 ,  张文成 ,  范乃成 ,  王建明

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明提供了一种多重PCR鉴别分枝杆菌病原核酸的试剂盒，包括引物组合物：5'‑acggtgggtactaggtgtgggtttc‑3'、5'‑tctgcgattagcgactaagacttca‑3'；5'‑gcgttgaccgagatggattat‑3'、5'‑gctcatctcacccagttggc‑3'；5'‑ttccgaatcccttgtga‑3'、5'‑ggagagcgccgttgta‑3'或5'‑agtcgccgtggcttctctttta‑3'。本发明该试剂盒灵敏度好，特异性高，操作简单，能实现致病性与非致病性分枝杆菌快速、大通量的检测。

公开(公告)号：CN112210556A

公开(公告)日：2021-01-12

申请号：CN202011101288.3

申请日：2020-10-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  贾苗苗 ,  曹舒扬 ,  朱立麒 ,  殷俊

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  A61K31/7088 ,  A61P1/16

Abstract: 本发明提供了一组靶向干扰IL‑33基因或蛋白表达的shRNA、重组腺病毒载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一组靶向干扰IL‑33基因或蛋白表达的shRNA，其对应的核苷酸序列如SEQ ID NOs：1～3所示。本发明还提供了一组分别包含3个shRNA序列的重组腺病毒载体。将三种重组腺病毒载体分别与穿梭质粒在脂质体和DMEM培养基条件下侵染真核细胞，包装成3种能干扰IL‑33基因表达的重组腺病毒。将三种重组腺病毒共同使用，能有效降低小鼠体内IL‑33基因和蛋白的表达，为深入研究IL‑33作为肝纤维化治疗靶点的机制提供技术支持。

公开(公告)号：CN109652449A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201811495616.5

申请日：2018-12-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  朱立麒 ,  谢灵志 ,  郭晓宇 ,  朱鸿飞

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  C12N15/12 ,  C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种EP153R与EP402R基因共表达重组腺病毒载体构建及腺病毒包装方法，属于基因工程技术领域。一种EP153R基因与EP402R基因过表达腺病毒载体pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-EP402R，以pShuttle-CMV真核表达载体为基础，在多克隆位点处引入CTLA4、EP153R、EP402R基因。本发明还提供了共表达EP153R、EP402R基因的重组腺病毒，利用构建得到的pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-EP402R载体实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染动物或真核细胞的腺病毒，从而实现了EP153R与EP402R基因在真核细胞中共表达的目的，为研究实现EP153R与EP402R基因共表达的腺病毒疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN108504687A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810265019.7

申请日：2018-03-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  朱辰 ,  钱淼 ,  王涛

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N15/34 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP402R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种表达EP402R基因重组腺病毒质粒pAD-EP402R，以pAD-EF1α-GFP腺病毒表达载体为基础，在多克隆位点处引入EP402R基因。本发明还提供了表达EP402R基因的重组腺病毒的制备方法，利用构建得到的pAD-EP402R质粒与腺病毒包装体系PEI混合，实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒，从而实现了EP402R基因在真核细胞中正常表达的目的，为研究表达EP402R基因重组腺病毒载体候选疫苗奠定基础。

公开(公告)号：CN108441514A

公开(公告)日：2018-08-24

申请号：CN201810263671.5

申请日：2018-03-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  于宁 ,  钱淼 ,  王涛

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N15/34 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒CP204L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法，属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP，经一系列中间过程，得到重组腺病毒表达质粒pAD-CP204L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞；根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒，最终实现腺病毒包装过程，并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒，从而实现了CP204L基因在真核细胞中正常表达的目的，为研究基于表达CP204L的腺病毒载体疫苗奠定基础。

公开(公告)号：CN113462654A

公开(公告)日：2021-10-01

申请号：CN202110937064.4

申请日：2021-08-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 朱立麒 ,  张琼杰 ,  张泉 ,  钱淼 ,  金珊昊 ,  李辉

IPC: C12N5/20 ,  C12N15/70 ,  C07K16/12 ,  C07K14/205 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用，属于单克隆抗体技术领域。本发明针对肝螺杆菌CdtB蛋白检测空白的问题，用具有良好免疫原性的肝螺杆菌CdtB第19位至273位氨基酸区域经重组表达免疫动物，筛选得到分泌肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D9，保藏编号为CCTCCNO：C2021140。杂交瘤细胞株2D9分泌的肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体可特异性结合肝螺杆菌CdtB蛋白，具具有亲和力高、特异性好的特点，且为小鼠IgG1亚型，为利用免疫学检测方法检测或诊断肝螺杆菌的感染提供了基础，为肝螺杆菌相关疾病的研究、新型诊断试剂的研制提供有力的研究基础。

公开(公告)号：CN112592937A

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN202011589615.4

申请日：2020-12-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  朱立麒 ,  殷俊

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了D117L、F317L和EP364R共表达重组腺病毒载体、重组腺病毒及构建和应用，属于基因工程技术领域，所述基因插入到pShuttle‑CMV真核表达载体上，能够用于构建表达非洲猪瘟病毒D117L、F317L和EP364R蛋白的重组腺病毒，该重组腺病毒能够直接感染真核细胞，从而实现D117L、F317L与EP364R基因在真核细胞中共表达的目的，为进一步研究基于共表达D117L、F317L与EP364R基因重组腺病毒载体疫苗打好基础。

公开(公告)号：CN109735567A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201910046928.6

申请日：2019-01-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  黄明生 ,  谢灵志 ,  朱立麒 ,  殷俊

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟EP153R与P54基因共表达的重组腺病毒载体构建及腺病毒包装方法，属于基因工程技术领域。一种EP153R基因与P54基因过表达腺病毒载体，以pShuttle-CMV真核表达载体为基础，在多克隆位点处引入CTLA4、EP153R、P54基因。本发明还提供了共表达EP153R、P54基因的重组腺病毒，利用构建得到的pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-P54载体实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染动物或真核细胞的腺病毒，从而实现了EP153R与P54基因在真核细胞中共表达的目的，为研究实现EP153R与P54基因共表达的腺病毒疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN108531511A

公开(公告)日：2018-09-14

申请号：CN201810263672.X

申请日：2018-03-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  曹舒扬 ,  钱淼 ,  王涛

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N15/34 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒E183L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种表达E183L基因重组腺病毒质粒pAD-E183L，以pAD-EF1α-GFP腺病毒表达载体为基础，在多克隆位点处引入E183L基因。本发明还提供了表达E183L基因的重组腺病毒的制备方法，利用构建得到的pAD-E183L质粒与腺病毒包装体系PEI混合，实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒，从而实现了E183L基因在真核细胞中正常表达的目的，为研究表达E183L基因重组腺病毒载体候选疫苗奠定基础。