一种酶促合成山奈酚的方法

    公开(公告)号:CN107880134B

    公开(公告)日:2021-03-23

    申请号:CN201711126059.5

    申请日:2017-11-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种酶促合成山奈酚的方法,其中涉及两种融合蛋白TrxA‑His‑F3H、TrxA‑His‑FLS1的制备及酶活性检测,并设计缓冲液体系,反应缓冲液为0.1 M Tris‑HCl(pH7.2),100μL反应体系中含有0.4%抗坏血酸、10%甘油、8.2 mMα‑酮戊二酸、0.01 mM硫酸亚铁、0.5 mM柚皮素、3.3μg TrxA‑His‑F3H、1.8μg TrxA‑His‑FLS1;并通过优化反应体系pH值、反应时间和温度,在体外建立一步高效合成山奈酚的方法。CCK‑8法检测合成的山奈酚对肿瘤细胞生长的抑制作用。

    一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用

    公开(公告)号:CN113528471A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110817915.1

    申请日:2021-07-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种从头合成黄烷酮的高活性三功能酶,将4‑香豆酰辅酶A连接酶基因和查尔酮异构酶基因、查尔酮合酶基因克隆至原核表达载体构建重组质粒,再转化大肠杆菌,以诱导表达重组酶,并利用纯化的重组酶建立无细胞合成体系,实现黄烷酮的体外酶促合成。本发明克服了黄烷酮的体外多酶合成体系中产量和底物转化率较低的问题,同时建立一种成分简单的体外酶促合成体系,不存在工程菌细胞内复杂的调控作用,反应过程易于精确控制、副产物少、产品分离相对简单、生产周期明显缩短、生产成本显著降低。

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