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公开(公告)号:CN114807402A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210607051.5
申请日:2022-05-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种特异性检测蛭弧菌数量的绝对定量PCR引物及检测方法,包括特异性引物;检测方法包括:提取待测样品的DNA;通过特异性引物对提取的待测样品DNA进行PCR扩增;对PCR扩增后的产物进行纯化;将纯化后的DNA与载体进行连接扩培,制得重组质粒;对重组质粒进行提取,并进行浓度测定;将提取的重组质粒进行倍比稀释,制得重组质粒标准模板;将特异性引物加入到重组质粒标准模板中,进行荧光定量PCR检测,建立CT值与拷贝数之间的转换关系;将特异性引物加入到需要检测的样品中,进行荧光定量PCR检测,测定样品的CT值,根据CT值与拷贝数之间的转换关系,得出拷贝数。本发明能够准确检测出蛭弧菌,并且检测过程简单易操作。