公开(公告)号：CN118853578A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410819735.0

申请日：2024-06-24

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 吉春苗 ,  王斌 ,  陈瑞爱 ,  伍利东 ,  姚凯慎

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C07K14/435 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种高效生产外源蛋白的哺乳动物细胞系及其构建方法、应用。具体的，哺乳动物细胞系的构建方法包括：构建用于敲除HEK293F细胞中H11位点附近预设长度基因的敲除质粒；构建含有外源蛋白基因的同源模板质粒；将所述敲除质粒、同源模板质粒共同转染HEK293F细胞，并培养；其中，所述同源模板质粒还含有依次连接的H11位点5’同源臂、CMV启动子和H11位点3’同源臂。本发明通过在哺乳动物HEK293F细胞基因组H11位点插入外源目的蛋白基因，构建了稳定表达细胞株，从而实现高效生产目的蛋白，为蛋白产品表达和生产提供新方法。

公开(公告)号：CN116284453A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310241120.X

申请日：2023-03-13

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 吉春苗 ,  王斌 ,  陈瑞爱 ,  冯晓茵

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了猪流行性腹泻病毒S蛋白突变体及其制备方法、应用。本发明基于对猪流行性腹泻病毒流行毒株S蛋白的深入分析，对其进行了一系列突变，主要包括，突变S1和S2结构域连接处的切割位点，使得S蛋白三聚体结构更为稳定；突变多个位点的氨基酸，以保证S蛋白处于融合前的三聚体构象状态；突变其信号肽为IL‑2分泌信号肽，以利于S蛋白三聚体分泌表达等。基于上述突变得到的猪流行性腹泻病毒S蛋白三聚体可刺激机体产生更强的免疫反应，为猪流行性腹泻病毒检测试剂盒、疫苗、治疗药物的研发提供了良好的平台，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN116333168A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202310135368.8

申请日：2023-02-17

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 吉春苗 ,  王斌 ,  陈瑞爱 ,  伍利东 ,  魏娇

IPC: C07K19/00 ,  C07K14/17 ,  C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒S蛋白三聚体纳米颗粒，由猪流行性腹泻病毒S蛋白三聚体和I53‑50A的复合物与I53‑50B蛋白组装得到；所述猪流行性腹泻病毒S蛋白三聚体和I53‑50A的复合物由第一重组载体经转染、表达、纯化而得；所述第一重组载体包括第一载体和连接于所述第一载体上的第一核苷酸序列，所述第一核苷酸序列由如SEQ ID No.1所示的第一氨基酸序列通过哺乳动物细胞密码子优化后得到。本发明提供的猪流行性腹泻病毒S蛋白三聚体纳米颗粒为开发针对PEDV安全、高效的广谱纳米颗粒疫苗提供有效途径。