-
公开(公告)号：CN115197961B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202210698321.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/34 , C12N5/10 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用，在将B602L重组蛋白完成序列改造后，将其克隆至真核表达载体，进行真核表达，经过筛选能得到稳定表达B602L重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白的CHO细胞株，并在没有G418筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。
-
公开(公告)号：CN116479045A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310232502.6
申请日：2023-03-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程及生物检测技术领域，公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为：根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息，在起始密码子ATG之前添加Kozac序列，在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列，在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签，得到改造后的p27序列；然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体，构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27；将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞，然后通过G418加压筛选，得到单克隆细胞，扩大培养，得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115197961A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210698321.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/34 , C12N5/10 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用，在将B602L重组蛋白完成序列改造后，将其克隆至真核表达载体，进行真核表达，经过筛选能得到稳定表达B602L重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白的CHO细胞株，并在没有G418筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。
-
公开(公告)号：CN115044613A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210699886.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/62 , C12N15/34 , C12N5/10 , C12P21/02 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种表达猪圆环病毒cap蛋白的基因工程细胞系及其构建方法和应用，通过对猪圆环病毒cap蛋白核酸序列进行优化合成，克隆至pCMV载体上构建真核表达质粒pCMV‑PCV2cap，通过转染CHO细胞，再经加压筛选获得。本发明将构建的pTT5‑PCV2cap质粒瞬转到293T细胞，提供了一种间接ELISA的方法检测PCV2。本发明利用基因工程技术通过哺乳动物细胞表达系统构建了一种表达猪圆环病毒cap蛋白的细胞系，该细胞系具有与亲本细胞相似的生物特性，表达的重组蛋白能用于PCV2血清学诊断用抗原的研究，对于PCV2的诊断和疫苗生产具有非常重要的意义。
-
公开(公告)号：CN116444654A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310268334.6
申请日：2023-03-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C07K16/08 , C12N15/70 , C12N5/20 , C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体及制备方法和应用。本发明采用重组质粒pET28b‑p72进行表达纯化后得到p72蛋白免疫小鼠，选择血清抗体效价最高的小鼠进行腹腔注射p72蛋白加强免疫，然后取加强免疫后小鼠脾细胞与sp2/0细胞进行融合，筛选出分泌抗p72抗体的阳性杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆，得到抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体细胞株。本发明利用原核表达系统表达ASFV p72蛋白，成功制备了能稳定分泌与ASFVp72蛋白特异性结合的单克隆抗体的细胞株，该抗体纯度高、亲和性和特异性强。
-
公开(公告)号：CN115948471A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211539660.8
申请日：2022-12-02
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/867 , C12N15/44 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物工程及疫苗制备技术领域，公开了一种H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒的表达制备方法。所述制备方法为：将H5亚型AIV的HA蛋白序列中的血凝素信号肽序列替换成蜂毒素信号肽序列，并设计酶切位点，得到目的基因HA；通过双酶切将目的基因HA和M1蛋白序列分别克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac1‑dual，再转化至DH5α感受态细胞，得到重组质粒，然后加入到DH10Bac感受态细胞中培养，提取得到重组杆粒Bacmid‑HA‑M1，最后转染至SF9昆虫细胞进行VLPs表达制备。本发明方法表达的病毒样颗粒与天然AIV病毒粒子相类似，并能显著提升目的蛋白在细胞培养上清中的表达量。
-
公开(公告)号：CN115044612A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210699860.3
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒p72蛋白稳定表达细胞系及其构建方法，在将p72蛋白完成序列改造得到重组蛋白后，分别将其克隆至原核表达载体、真核表达载体，分别进行原核表达、真核表达和；其中，在原核表达的过程中，能得到稳定表达p72重组蛋白的大肠杆菌以及能得到纯化后的p72重组蛋白；经过真核表达后，能得到稳定表达p72重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在2个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的CHO细胞株，并在没有嘌呤霉素筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，成功率为90％，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。
-
-
-
-
-
-
Search Results
7
records
(took 0.057 seconds)
