一种用于骨干载体的RNAi表达框及相应载体和应用

    公开(公告)号:CN116855532A

    公开(公告)日:2023-10-10

    申请号:CN202310811822.7

    申请日:2023-07-04

    Abstract: 本发明公开了一种用于骨干载体的RNAi表达框及相应载体和应用。本发明的表达框可以抑制MLH1基因表达并且实现了引导编辑后将其切除。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA和OsMLH RNAi表达框和激活Cre重组酶表达的表达框;所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述的骨干质粒载体中,pegRNA表达框和融合蛋白表达框、OsMLH RNAi表达框及Cre表达框位于同一双元载体中。本发明的PE‑MLH1i‑Cre引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率,并能获得纯合突变植株,具有很好的应用前景。

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