肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN105018400A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201510297753.8

    申请日:2015-06-03

    Abstract: 本发明公开了肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株,敲除了ssrA基因689位至ssrB基因63位氨基酸共计915个碱基对的缺失菌株。本发明还公开了肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株的构建方法,步骤包括:(1)获取ssrAB的SN和SC基因,并OverLap PCR进行上下游同源臂的连接;(2)重组自杀质粒pWM91-ssrAB的构建;(3)细菌的固相接合;(4)G9-2012(ΔssrAB)的筛选和获得。本发明的有益效果在于G9-2012(ΔssrAB)菌株在体内的定殖率减低,毒力明显减弱,可用于研制肠炎沙门氏菌减毒活疫苗或活载体疫苗,进而减低人或动物感染该病原菌的几率,保障人类的健康。

    一种肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株

    公开(公告)号:CN105018400B

    公开(公告)日:2020-02-11

    申请号:CN201510297753.8

    申请日:2015-06-03

    Abstract: 本发明公开了肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株,敲除了ssrA基因689位至ssrB基因63位氨基酸共计915个碱基对的缺失菌株。本发明还公开了肠炎沙门氏菌ssrAB基因缺失菌株的构建方法,步骤包括:(1)获取ssrAB的SN和SC基因,并OverLap PCR进行上下游同源臂的连接;(2)重组自杀质粒pWM91‑ssrAB的构建;(3)细菌的固相接合;(4)G9‑2012(ΔssrAB)的筛选和获得。本发明的有益效果在于G9‑2012(ΔssrAB)菌株在体内的定殖率减低,毒力明显减弱,可用于研制肠炎沙门氏菌减毒活疫苗或活载体疫苗,进而减低人或动物感染该病原菌的几率,保障人类的健康。

    同步检测鸡四种病毒试剂盒的制备方法

    公开(公告)号:CN1072727C

    公开(公告)日:2001-10-10

    申请号:CN98106744.1

    申请日:1998-03-25

    Abstract: 本发明提供了一种同步检测鸡新城疫ND、传染性德氏囊IBD、传染性支气管炎IB和(产蛋单下降综合症)EDS四种病毒的条形酶标斑点试剂盒的制备方法,其方法是取鸡NDV、IBDV、IBV和EDS四种抗体,用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释制成包被液;用此包被液对硝酸纤维膜进行包被,包被好的硝酸纤维膜与其他相应试剂配合使用。该试剂盒通过一次取样即可同时检测上述四种病毒,并具有操作方法简便,快速、灵敏、可靠及经济等显著的优点,是一项值得推广的技术。

    一种琼脂扩散法检测鸭黄病毒抗体的方法

    公开(公告)号:CN102914647A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210171724.3

    申请日:2012-05-29

    Abstract: 本发明提供了一种琼脂扩散法检测鸭黄病毒抗体的方法,属于兽医传染病学和免疫学领域。所检测的鸭黄病毒为安徽某鸭场分离株,将病料接种SPF鸡胚,传至5代,获得稳定毒株,命名为鸭黄病毒AH-F10株。尿囊液经甲醛灭活加入白油佐剂乳化,制备灭活疫苗,连续两次免疫产蛋鸭获取鸭黄病毒阳性血清。该阳性血清与经甲醛灭活的鸭黄病毒液进行琼扩反应,可呈现清晰的沉淀带。通过不同缓冲液及缓冲液不同浓度对阳性血清琼扩效价的影响,确定该琼扩反应最适的缓冲液及缓冲液浓度。该方法可较为简便的诊断目前我国流行的鸭黄病毒病,做为流行病学调查的操作简便,效果明显,成本低廉的检测方法。

    同步检测鸡四种病毒试剂盒的制备方法

    公开(公告)号:CN1197117A

    公开(公告)日:1998-10-28

    申请号:CN98106744.1

    申请日:1998-03-25

    Abstract: 本发明提供了一种同步检测鸡新城疫ND、传染性法氏囊IBD、传染性支气管炎IB和(产蛋下降综合症)EDS四种病毒的条形酶标斑点试剂盒的制备方法,其方法是取鸡NDV、IBDV、IBV和EDS四种抗体,用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释制成包被液;用此包被液对硝酸纤维膜进行包被,包被好的硝酸纤维膜与其他相应试剂配合使用。该试剂盒通过一次取样即可同时检测上述四种病毒,并具有操作方法简便,快速、灵敏、可靠及经济等显著的优点,是一项值得推广的技术。

    一种提高猪圆环病毒2型全病毒灭活疫苗抗原量的方法

    公开(公告)号:CN102210857A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201010138882.X

    申请日:2010-04-02

    Abstract: 本发明涉及一种提高猪圆环病毒2型(PCV2)全病毒灭活疫苗抗原量的制作方法。该方法的工艺过程主要包括细胞增殖PCV2培养灭活液的取得、4层无菌纱布的初效过滤、100KD中空纤维超滤膜组件的中效过滤和6KD中空纤维超滤膜组件的高效过滤。实验结果表明:该方法可使PCV2全病毒灭活疫苗抗原量浓缩提高10倍,且对经浓缩的PCV2抗原特性无任何影响,增强了疫苗的免疫效力。因此,该方法具有制作简便、易生产、成本低廉、质量可控、浓缩比率高、实际效果好、且无三废问题等优点。

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