公开(公告)号：CN118086172A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410336313.8

申请日：2024-03-22

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 袁凌云 ,  王高霞 ,  李敏 ,  汪承刚 ,  刘海燕 ,  侯金锋 ,  许钟戈 ,  王文杰 ,  陈国户 ,  唐小燕 ,  吴建强 ,  董嘉诚 ,  何雨欣

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提供了一种乌菜原生质体的制备方法，步骤如下：(1)取乌菜叶片于酶解液；(2)抽真空，震荡酶解；(3)细胞筛过滤酶解液，同时用WS清洗液洗涤筛上未酶解组织，收集洗涤液；(4)将过滤酶解液与洗涤液合并，离心去上清，用WS清洗液重悬沉淀，重悬后液体细胞筛过滤；留取细胞筛滤液的同时，用WS清洗液洗涤筛上残留组织，收集洗涤液；将细胞筛滤液与洗涤液合并后离心，用WS清洗液重悬沉淀，即得乌菜原生质体；(5)在离心管中加蔗糖与乌菜原生质体，离心后上清为纯化后原生质体。本发明通过比较不同酶解酶种类、浓度、酶解时间、离心率等因素，优化出乌菜原生质体制备的最适条件，为乌菜改良育种提供新途径和新思路。