公开(公告)号：CN111172184A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010161676.4

申请日：2020-03-10

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 何炜 ,  孙彬玉 ,  程昉 ,  李明洋 ,  董继程 ,  刘波

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于基因修饰得到的人重组干扰素融合基因、融合蛋白及其制备方法，属于生物制品技术领域。基于基因修饰得到人重组干扰素IFN-β的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由基因编码的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明对人重组干扰素IFN-β基因序列进行扩增，与质粒pET-28a(+)相连接得到融合基因，再将融合基因转染至大肠杆菌BL21(DE3)中进行扩增和表达得到了可溶性的融合蛋白，解决了大肠杆菌中无法获得可溶性干扰素的问题。本发明还提供了从稳定细胞系获得高纯度的IFN-KE50蛋白的纯化方法，由于其具有组氨酸标签，用固定金属镍进行亲和层析可以对目标蛋白进行有效的纯化，纯化后蛋白纯度可达到94.8％。简化了后续的纯化步骤，并可以获得更高的纯度。

公开(公告)号：CN117165569A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202311072652.1

申请日：2023-08-24

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  董继程 ,  吴学松 ,  张强 ,  王黎 ,  梁长海

IPC: C12N11/10 ,  C12N9/88 ,  C12P13/02

Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶的固载与微环境调控方法及用于己二腈的转化，所述的方法有两步，第一步是对琼脂糖微球表面的羟基进行活化；第二步反应是将活化后的微球在低温下与NHase缓冲溶液进行孵育，由此实现NHase在琼脂糖微球上的定点共价偶联。该发明通过改变琼脂糖微球的活化试剂，提供了一种调控NHase微环境的固载酶方法，实现了对于固定化NHase催化性能(相对活性、选择性、稳定性)的调控。被认为是一种绿色可控、潜力巨大的固载酶方法。

公开(公告)号：CN117123201A

公开(公告)日：2023-11-28

申请号：CN202310768267.4

申请日：2023-06-27

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  刘宇阳 ,  刘波 ,  董继程 ,  王勇

IPC: B01J20/281 ,  B01J20/30 ,  B01D15/38

Abstract: 本发明提供了一种Oligo‑dT亲和层析填料及其制备方法。所述层析材料由乙烯基砜功能化的微球和Oligo‑dT制备而成。所述Oligo‑dT亲和层析填料的制备方法为：1)在pH为5‑10的含盐的偶联缓冲液中，将5’端和3’端未进行预修饰的Oligo‑dT与乙烯基砜功能化的微球反应3～24h；2)将多余的乙烯基砜用封闭试剂封闭处理，得到Oligo‑dT的亲和层析填料。本发明所制备的Oligo‑dT亲和层析填料具有很高的Oligo‑dT密度，制备方法简单，偶联效率高，并且不需要对Oligo‑dT的5’端和3’端进行预修饰，从而降低了生产成本。

公开(公告)号：CN110078829A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910356933.7

申请日：2019-04-29

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  李明洋 ,  董继程 ,  汪晴

IPC: C07K17/02 ,  C12N11/02 ,  A61K47/42

Abstract: 本发明公开了一种基于乙烯基砜表面反应的组氨酸标签蛋白定点共价固定新方法。所述的组氨酸标签蛋白定点共价固定方法，以表面含有乙烯基砜基团的基底材料作为蛋白质固定载体，在近中性条件的蛋白质溶液中室温下即可以实现组氨酸标签与表面乙烯基砜的反应，从而实现组氨酸标签蛋白在乙烯基砜表面的定点共价固定。本发明的定点共价固定新方法定向性强，特异性高，固定化的蛋白质稳定性高，反应条件温和并且实验方法简单，该方法所用试剂均为常规试剂，成本低廉。本发明的组氨酸标签蛋白共价固定新方法在酶固定化，生物芯片制备，微阵列制备及靶向给药系统构建中均具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN116479084A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310105750.4

申请日：2023-02-13

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  刘冲 ,  董继程 ,  王勇 ,  张强 ,  王华楠 ,  何炜

IPC: C12Q1/02 ,  C08F220/38 ,  C09D133/14 ,  G01N33/76 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种基于乙烯基砜表面的双向密度梯度构建方法，所述方法以油墨注射的方式或反应时间控制的方式在乙烯基砜功能化样品表面上制备生物分子或荧光素梯度样品；随后将所得样品浸没在具有抗垢能力的生物惰性的单体水溶液中，在样品表面剩余乙烯基砜基团上通过表面引发碳阴离子介导的阴离子聚合反应生长聚合物刷。该方法底物适用范围广；反应条件温和，能够在生物分子或荧光素密度表面直接生长聚合物刷而无需任何表面改性；是一种适用于制备生物分子或荧光素和惰性分子的双向梯度的通用方法。

公开(公告)号：CN110078829B

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN201910356933.7

申请日：2019-04-29

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  李明洋 ,  董继程 ,  汪晴

IPC: C07K17/02 ,  C12N11/02 ,  C12N11/14 ,  C12N11/089 ,  A61K47/42

Abstract: 本发明公开了一种基于乙烯基砜表面反应的组氨酸标签蛋白定点共价固定新方法。所述的组氨酸标签蛋白定点共价固定方法，以表面含有乙烯基砜基团的基底材料作为蛋白质固定载体，在近中性条件的蛋白质溶液中室温下即可以实现组氨酸标签与表面乙烯基砜的反应，从而实现组氨酸标签蛋白在乙烯基砜表面的定点共价固定。本发明的定点共价固定新方法定向性强，特异性高，固定化的蛋白质稳定性高，反应条件温和并且实验方法简单，该方法所用试剂均为常规试剂，成本低廉。本发明的组氨酸标签蛋白共价固定新方法在酶固定化，生物芯片制备，微阵列制备及靶向给药系统构建中均具有广泛的应用前景。