环介导切刻等温-CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112921119B

    公开(公告)日:2024-01-23

    申请号:CN202110206812.1

    申请日:2021-02-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及环介导切刻等温‑CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法。本发明对裂谷热病毒S基因中一个片段的设计了5条引物,并利用链置换Bst DNA聚合酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,实现核酸指数扩增;利用切刻酶切刻活性和Bst DNA聚合酶链置换活性生成大量单链片段。再利用Cas12a蛋白和向导RNA形成的二元复合体的模板依赖顺式切割活性介导的反式切割活性进行检测,快速、高效和准确;该技术对裂谷热病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,可以和胶体金试纸偶联实现快速实时检测,可以很好补充裂谷热病毒快速检测的方案。

    一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113046453B

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110312647.8

    申请日:2021-03-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段,然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起,构造双茎环扩增元件进行指数扩增,达到信号的指数放大。其中,锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针,将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端,可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测,信号明显,实现了双链点突变的快速检测,且具有很高的灵敏度和准确性,给与临床指导用药带来益处。

    一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113046453A

    公开(公告)日:2021-06-29

    申请号:CN202110312647.8

    申请日:2021-03-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段,然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起,构造双茎环扩增元件进行指数扩增,达到信号的指数放大。其中,锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针,将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端,可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测,信号明显,实现了双链点突变的快速检测,且具有很高的灵敏度和准确性,给与临床指导用药带来益处。

    混合阳离子-非离子表面活性剂为模板剂制备MCM-48中孔分子筛的方法

    公开(公告)号:CN1390785A

    公开(公告)日:2003-01-15

    申请号:CN02136300.5

    申请日:2002-07-30

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明以工业级水玻璃为硅源,十六烷基三甲基溴化胺简称CTAB为阳离子表面活性剂,聚乙二醇辛基苯基醚简称OP-10为非离子表面活性剂,两者的混合物为模板剂制备高热及水热稳定的MCM-48中孔分子筛。尽管当前有关MCM-48中孔分子筛合成上的问题已得到大大改善,但其水热稳定性差的缺点仍然是其未得到实际应用的主要阻碍。通过调节CTAB与OP-10的摩尔比值、CTAB与硅的摩尔比值以及改变焙烧条件,可得到规整度高、水热稳定性好的MCM-48中孔分子筛,本方法操作简单,成本低且可减少污染。

    一种寨卡病毒的检测方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN113122658B

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202110224353.X

    申请日:2021-03-01

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种寨卡病毒的检测方法和试剂盒。本发明第一方面提供了一种寨卡病毒的检测方法,通过滚环扩增和CRISPR技术联用的方式对寨卡病毒进行检测。本发明提供的寨卡病毒检测方法,通过滚环扩增和CRISPR技术联用的方式,可用于寨卡病毒的检测,并且具有较高的特异性和灵敏度;此外,该检测方法所需的反应时间较短,并且只需要等温单重荧光通道检测设备,降低了检测成本,适合基层医疗单位推广使用。

    一种用于检测SARS-CoV-2的核酸组合物和试剂盒

    公开(公告)号:CN113151591A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110247815.X

    申请日:2021-03-06

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本申请公开了一种用于检测SARS‑CoV‑2的核酸组合物和试剂盒,涉及生物体外检测技术领域。所述核酸组合物包括锁式探针、第一滚环引物和第二滚环引物;所述锁式探针的序列如SEQ ID NO.1所示,第一滚环引物的序列如SEQ ID NO.2所示,第二滚环引物的序列如SEQ ID NO.3所示。所述试剂盒包括上述核酸组合物以及连接缓冲液、DNA连接酶、扩增缓冲液、重组酶、单链结合蛋白、链置换DNA聚合酶、dNTP和荧光指示剂。本申请将滚环扩增技术和重组酶聚合酶扩增技术进行了巧妙的融合,可在等温条件下对待测样本进行检测,无需价值昂贵、步骤繁琐的温度循环仪器,检测过程简单,且特异性强、灵敏度高。

    一种寨卡病毒的检测方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN113122658A

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN202110224353.X

    申请日:2021-03-01

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种寨卡病毒的检测方法和试剂盒。本发明第一方面提供了一种寨卡病毒的检测方法,通过滚环扩增和CRISPR技术联用的方式对寨卡病毒进行检测。本发明提供的寨卡病毒检测方法,通过滚环扩增和CRISPR技术联用的方式,可用于寨卡病毒的检测,并且具有较高的特异性和灵敏度;此外,该检测方法所需的反应时间较短,并且只需要等温单重荧光通道检测设备,降低了检测成本,适合基层医疗单位推广使用。

    环介导切刻等温-CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112921119A

    公开(公告)日:2021-06-08

    申请号:CN202110206812.1

    申请日:2021-02-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及环介导切刻等温‑CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法。本发明对裂谷热病毒S基因中一个片段的设计了5条引物,并利用链置换Bst DNA聚合酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,实现核酸指数扩增;利用切刻酶切刻活性和Bst DNA聚合酶链置换活性生成大量单链片段。再利用Cas12a蛋白和向导RNA形成的二元复合体的模板依赖顺式切割活性介导的反式切割活性进行检测,快速、高效和准确;该技术对裂谷热病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,可以和胶体金试纸偶联实现快速实时检测,可以很好补充裂谷热病毒快速检测的方案。

    混合阳离子-非离子表面活性剂为模板剂制备MCM-48中孔分子筛的方法

    公开(公告)号:CN1155518C

    公开(公告)日:2004-06-30

    申请号:CN02136300.5

    申请日:2002-07-30

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明以工业级水玻璃为硅源,十六烷基三甲基溴化胺简称CTAB为阳离子表面活性剂,聚乙二醇辛基苯基醚简称OP-10为非离子表面活性剂,两者的混合物为模板剂制备高热及水热稳定的MCM-48中孔分子筛。尽管当前有关MCM-48中孔分子筛合成上的问题已得到大大改善,但其水热稳定性差的缺点仍然是其未得到实际应用的主要阻碍。通过调节CTAB与OP-10的摩尔比值、CTAB与硅的摩尔比值以及改变焙烧条件,可得到规整度高、水热稳定性好的MCM-48中孔分子筛,本方法操作简单,成本低且可减少污染。

    免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114924067B

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202210399441.8

    申请日:2022-04-15

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于免疫检测病毒技术领域,具体为一种免疫检测病毒用纳米磁性微球材料及其制备方法。本发明的纳米磁性微球材料包括纳米二氧化硅磁珠、包被在纳米二氧化硅磁珠表面的具有结合病毒能力的一种或者多种材料。该纳米磁性微球材料用于免疫法检测液体样本中病毒,包括将修饰官能团和包覆一种或者多种材料的纳米二氧化硅磁珠富集液体样本中的病毒;用抗病毒表面结合位点的一抗进行免疫反应;对磁珠进行封闭;用含有异硫氰酸荧光素标记或辣根过氧化物酶标记的二抗与一抗结合;通过荧光显色或者化学发光法对液体样本中病毒的含量进行表征。本发明解决了液体样本中病毒载量较少而不易被聚合酶链式反应法检出的情况。

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