大鼠胰岛细胞分离纯化的改良方法

    公开(公告)号:CN1699556A

    公开(公告)日:2005-11-23

    申请号:CN200510040622.8

    申请日:2005-06-20

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明涉及细胞生物学技术领域,是包括涉及用新型Liberase RI酶灌注消化大鼠胰腺,和利用聚蔗糖Ficoll密度梯度离心分离大鼠胰岛细胞的方法。本发明将Liberase RI酶原位灌注大鼠胰腺使之完全膨胀,钝性分离胰腺并置于37℃水浴静止消化。消化物经两层不锈钢筛过滤后,用Ficoll密度梯度(25%,23%,21%和11%)离心纯化胰岛细胞。初步纯化的胰岛细胞培养过夜后,用连有橡皮管的玻璃针经操作者口腔及舌头的控制逐一挑出,从而得到完全纯净的大鼠胰岛细胞,得率1351+23个/胰腺,胰岛细胞进一步用二苯基硫巴腙染色证实。本发明极大地提高了传统分离方法的得率和效率,为降低大规模分离纯化人胰岛的成本奠定了基础,这对晚期糖尿病人的胰岛细胞移植具有重要的实践开拓意义。

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