一种制备、纯化HOPS复合物蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109913485A

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201910226507.1

    申请日:2019-03-25

    Inventor: 刘蓉 陈玉 郭仁朋

    Abstract: 本发明涉及一种制备、纯化HOPS复合物蛋白的方法,包括如下步骤:1)设计用于扩增组成人HOPS复合体的6种基因的编码区的引物;2)分别构建pET-His-NusA-TEV-HA-VPS11、pET-His-NusA-TEV-HA-VPS18、pET-His-NusA-TEV-HA-VPS39的重组质粒;分别构建pGEX 4T-1-GST-TEV-Flag-VPS16、pGEX 4T-1-GST-TEV-Flag-VPS33、pGEX 4T-1-GST-TEV-Flag-VPS41的重组质粒;3)将步骤2)构建的6种重组质粒分别转化大肠杆菌细胞,再进行融合蛋白的诱导表达和分离纯化。本发明可以简便地获得高特异性的HOPS复合物蛋白,为膜蛋白的分离纯化提供了更好的方法,能够为生物化学等基础研究提供支持。

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