一种基于噬菌体基因为靶标的柑橘黄龙病菌检测引物及其应用

    公开(公告)号:CN116083610A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202211619961.1

    申请日:2022-12-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于噬菌体基因为靶标的柑橘黄龙病菌检测引物及其应用。本发明基于柑橘黄龙病菌中多拷贝的噬菌体CLasMV1与CLas的同源基因位点设计了特异性实时荧光PCR引物GP04‑F/GP04‑R,当黄龙病样本中含有CLasMV1噬菌体时,本发明GP04‑F/GP04‑R引物能显著提高黄龙病菌的检测灵敏性,同时也可用于不含有CLasMV1噬菌体的黄龙病菌检测。同时本发明还提供了包含GP04‑F/GP04‑R引物的双重实时荧光PCR引物,在CLas低浓度的条件下使用该双重引物同时检测能显著提高检测的灵敏性,为实验室检测CLas提供了进一步的技术支持。

    一种基于噬菌体基因为靶标的柑橘黄龙病菌检测引物及其应用

    公开(公告)号:CN116083610B

    公开(公告)日:2023-11-07

    申请号:CN202211619961.1

    申请日:2022-12-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于噬菌体基因为靶标的柑橘黄龙病菌检测引物及其应用。本发明基于柑橘黄龙病菌中多拷贝的噬菌体CLasMV1与CLas的同源基因位点设计了特异性实时荧光PCR引物GP04‑F/GP04‑R,当黄龙病样本中含有CLasMV1噬菌体时,本发明GP04‑F/GP04‑R引物能显著提高黄龙病菌的检测灵敏性,同时也可用于不含有CLasMV1噬菌体的黄龙病菌检测。同时本发明还提供了包含GP04‑F/GP04‑R引物的双重实时荧光PCR引物,在CLas低浓度的条件下使用该双重引物同时检测能显著提高检测的灵敏性,为实验室检测CLas提供了进一步的技术支持。

    一种基于水培柑橘枝条和菟丝子的柑橘黄龙病菌快速富集方法

    公开(公告)号:CN110205259A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910381770.8

    申请日:2019-05-08

    Abstract: 本发明公开了一种基于水培柑橘枝条和菟丝子的柑橘黄龙病菌快速富集方法,通过采集田间感染柑橘枝条并构建对应的柑橘枝条水培体系,再利用菟丝子可以吸附“Ca.L.asiaticus”的特性,建立基于柑橘枝条-菟丝子的“Ca.L.asiaticus”富集体系,使“Ca.L.asiaticus”在菟丝子中大量富集;本发明得到的菟丝子样品中的“Ca.L.asiaticus”浓度平均增加了53倍,且富集所需要的时间大大缩短,实现了对“Ca.L.asiaticus”的高浓度、快速富集,而且获得的“Ca.L.asiaticus”富集后的菟丝子总DNA中干扰少,“Ca.L.asiaticus”基因组质量大大提高;利用本发明所述方法能够简易、高效地获得含有高浓度“Ca.L.asiaticus”的材料,促进“Ca.L.asiaticus”形态学和基因组学的研究。

    一种基于水培柑橘枝条和菟丝子的柑橘黄龙病菌快速富集方法

    公开(公告)号:CN110205259B

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN201910381770.8

    申请日:2019-05-08

    Abstract: 本发明公开了一种基于水培柑橘枝条和菟丝子的柑橘黄龙病菌快速富集方法,通过采集田间感染柑橘枝条并构建对应的柑橘枝条水培体系,再建立基于柑橘枝条‑菟丝子的“Ca.L.asiaticus”富集体系,使“Ca.L.asiaticus”在菟丝子中大量富集;本发明得到的菟丝子样品中的“Ca.L.asiaticus”浓度平均增加了53倍,且富集所需要的时间大大缩短,实现了对“Ca.L.asiaticus”的高浓度、快速富集,而且获得的“Ca.L.asiaticus”富集后的菟丝子总DNA中干扰少,“Ca.L.asiaticus”基因组质量大大提高。

    一种利用热处理防治柑橘黄龙病的方法

    公开(公告)号:CN103404397B

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN201310318834.2

    申请日:2013-07-26

    Abstract: 本发明具体公开了一种利用热处理防治柑橘黄龙病的方法。具体步骤为将已染黄龙病的柑橘树体置于45~52℃环境下持续热处理2~5小时,然后将树体置于环境温度下培育;接下来一周重复以上操作,连续处理3~4周。本发明所用的方法经济环保,能大大减少或消除病树中的病原细菌的含量,使实验树的树势恢复并正常生长,柑橘的产量和品质显著提高。

    一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用

    公开(公告)号:CN109706255B

    公开(公告)日:2021-12-24

    申请号:CN201910104175.X

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用,内参基因为gyrA和ftsZ,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。本发明首次筛选出适用于柑橘黄龙病菌感染不同寄主、感染寄主后不同时期时基因表达分析的内参基因组合gyrA和ftsZ,进一步提供了其特异性引物,为柑橘黄龙病菌基因的准确定量检测提供可靠保证,同时可以以此来检测样本是否感染柑橘黄龙病菌。本发明筛选出的内参基因组合gyrA和ftsZ具有可靠性高、稳定性好和适用性广的优势。利用此内参基因组合构建的对柑橘黄龙病菌的检测方法及检测试剂盒相比单个或传统的内参基因具有巨大的优势,值得大面积推广和应用。

    一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用

    公开(公告)号:CN109706255A

    公开(公告)日:2019-05-03

    申请号:CN201910104175.X

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用,内参基因为gyrA和ftsZ,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。本发明首次筛选出适用于柑橘黄龙病菌感染不同寄主、感染寄主后不同时期时基因表达分析的内参基因组合gyrA和ftsZ,进一步提供了其特异性引物,为柑橘黄龙病菌基因的准确定量检测提供可靠保证,同时可以以此来检测样本是否感染柑橘黄龙病菌。本发明筛选出的内参基因组合gyrA和ftsZ具有可靠性高、稳定性好和适用性广的优势。利用此内参基因组合构建的对柑橘黄龙病菌的检测方法及检测试剂盒相比单个或传统的内参基因具有巨大的优势,值得大面积推广和应用。

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