公开(公告)号：CN107258141B

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN201710542726.1

申请日：2017-07-05

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张启翔 ,  卓孝康 ,  郑唐春 ,  程堂仁 ,  王佳 ,  杨炜茹 ,  张智勇 ,  马开峰

IPC: A01C1/00 ,  A01C1/08 ,  A01G31/00

Abstract: 本发明涉及一处梅花种子的萌发方法，包括如下步骤：1)将梅花种子去壳；2)用赤霉素对去壳后的梅花种子进行浸泡处理；3)用次氯酸钠对浸泡处理后的梅花种子进行消毒处理；4)将消毒处理后的梅花种子播种于消毒后的蛭石基质中，在4℃条件下冷藏45～60d。本发明的方法可提早打破梅花种子休眠、提高萌发率和出苗率、缩短育苗周期，有很强的生产实践价值。而且本方法具有出苗整齐、成本低的特点。在本发明基础上，可加快梅花新品种的繁育和生产，减少杂交种子在冷藏和播种过程死亡。

公开(公告)号：CN107258141A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710542726.1

申请日：2017-07-05

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张启翔 ,  卓孝康 ,  郑唐春 ,  程堂仁 ,  王佳 ,  杨炜茹 ,  张智勇 ,  马开峰

IPC: A01C1/00 ,  A01C1/08 ,  A01G31/00

Abstract: 本发明涉及一处梅花种子的萌发方法，包括如下步骤：1)将梅花种子去壳；2)用赤霉素对去壳后的梅花种子进行浸泡处理；3)用次氯酸钠对浸泡处理后的梅花种子进行消毒处理；4)将消毒处理后的梅花种子播种于消毒后的蛭石基质中，在4℃条件下冷藏45～60d。本发明的方法可提早打破梅花种子休眠、提高萌发率和出苗率、缩短育苗周期，有很强的生产实践价值。而且本方法具有出苗整齐、成本低的特点。在本发明基础上，可加快梅花新品种的繁育和生产，减少杂交种子在冷藏和播种过程死亡。

公开(公告)号：CN104293890A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201310298633.0

申请日：2013-07-16

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张德强 ,  宋跃朋 ,  马开峰

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2525/191 ,  C12Q2521/301 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种检测植物花器官特异性DNA甲基化修饰位点的方法及试剂盒。其中，包括以下步骤：S1，提取植物花器官基因组DNA；S2，对植物花器官基因组DNA进行酶切；S3，分别对酶切产物连接上限制性内切酶的接头；S4，以接头为模板设计的预扩增引物进行PCR预扩增，得PCR预扩增产物；S5，将PCR预扩增产物稀释后，加入带有选择性碱基的筛选引物进行PCR扩增；S6，电泳检测PCR扩增产物，统计并分析DNA条带，S7，回收、克隆S6中得到的DNA甲基化差异条带并进行测序。采用本发明提供的接头、预扩增引物和筛选引物，能够稳定、高效地检测植物花器官特异性DNA甲基化修饰位点。

公开(公告)号：CN107646465A

公开(公告)日：2018-02-02

申请号：CN201710816390.3

申请日：2017-09-12

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  卓孝康 ,  程堂仁 ,  王佳 ,  袁存权 ,  马开峰

IPC: A01G17/00 ,  C05G3/00

CPC classification number: A01G17/005 ,  C05F11/02 ,  C05G3/00

Abstract: 本发明涉及一种高效简易的嫩枝扦插梅花生根方法，包括准备育苗基质、采集插穗、插穗处理、扦插、环境控制、扦插后管理、扦插苗移栽等过程。主要改进为扦插时间选在5月初，剪取直径2～4mm梅花幼嫩半木质化枝条，将叶片保留1/3～1/2叶并分割成5～6cm含有2～3个芽的插穗；插穗基部消毒后浸泡于IBA生长素溶液中20～40s，扦插过程中培养液的配方为，1/2WPM培养基+IBA(0.15～0.30mg/L)+NAA(0.15mg/L)。通过上述改进，本发明的方法可以快速、大量的获得梅花扦插苗，用于规范化生产扩繁与科学研究。

公开(公告)号：CN104830896A

公开(公告)日：2015-08-12

申请号：CN201510172958.3

申请日：2015-04-13

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 包菲 ,  张启翔 ,  程堂仁 ,  潘会堂 ,  王佳 ,  孙丽丹 ,  马开峰 ,  杨炜茹 ,  周育真

IPC: C12N15/82

Abstract: 本发明涉及一种用植物花瓣细胞原生质体表达蛋白的方法，该方法包括以下步骤：(1)以植物花瓣作为材料，酶解获得花瓣细胞原生质体；(2)将所述花瓣细胞原生质体在2-8℃静置20-40min；(3)用PEG和Ca2+介导法将质粒转化入原生质体，表达目的蛋白。与现有技术相比，本发明的有益效果是可以在短时间内表达目的蛋白，此原生质体蛋白表达系统可用于目的蛋白的亚细胞定位、蛋白分子的相互作用的研究。原生质体活性正常，经目的蛋白表达检测，可用于研究活体细胞内基因转录水平、蛋白表达水平、物质代谢水平的变化，是一种方便而快捷的研究目的基因功能的方法。

公开(公告)号：CN104293893A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201310298785.0

申请日：2013-07-16

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张德强 ,  马开峰 ,  宋跃朋

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2525/191 ,  C12Q2521/301 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种采用MSAP技术检测林木木质部DNA甲基化的方法及试剂盒。其中，该方法包括以下步骤：S1，提取林木木质部DNA；S2，分别用EcoRI/HpaII、EcoRI/MspI两组酶对林木木质部DNA进行酶切；S3，分别对酶切得到的产物连接上限制性内切酶的接头；S4，以接头为模板设计的预扩增引物进行PCR预扩增，得PCR预扩增产物；S5，将PCR预扩增产物稀释后，加入带有选择性碱基的筛选引物进行PCR扩增；S6，电泳检测PCR扩增产物，统计并分析DNA条带。应用本发明的技术方案，能够为表观遗传变异研究提供有力的技术支持，为目标的林木分子标记辅助育种提供新的候选标记位点。