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公开(公告)号：CN106318948B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201611039980.1
申请日：2016-11-22
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿MsNAP基因启动子及其应用，涉及生物技术领域中的豆科牧草。紫花苜蓿MsNAP基因启动子，其序列含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；其特异性引物包括：SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3；其表达载体为双酶切切除35S启动子后连接MsNAP的启动子序列的3302‑GUS载体。紫花苜蓿MsNAP基因启动子的应用是紫花苜蓿MsNAP的启动子序列或所述表达载体在调控植物的基因表达中的应用。本发明提供了MsNAP基因的启动子序列，并通过转基因技术对其功能进行验证，结果表明MsNAP启动子在衰老叶片中活性较强；为进一步探索调控紫花苜蓿衰老基因的表达，调控紫花苜蓿衰老奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106318948A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201611039980.1
申请日：2016-11-22
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿MsNAP基因启动子及其应用，涉及生物技术领域中的豆科牧草。紫花苜蓿MsNAP基因启动子，其序列含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；其特异性引物包括：SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3；其表达载体为双酶切切除35S启动子后连接MsNAP的启动子序列的3302-GUS载体。紫花苜蓿MsNAP基因启动子的应用是紫花苜蓿MsNAP的启动子序列或所述表达载体在调控植物的基因表达中的应用。本发明提供了MsNAP基因的启动子序列，并通过转基因技术对其功能进行验证，结果表明MsNAP启动子在衰老叶片中活性较强；为进一步探索调控紫花苜蓿衰老基因的表达，调控紫花苜蓿衰老奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107043736B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201710465517.1
申请日：2017-06-19
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种直接使用结缕草叶片制备原生质体的方法，涉及制备原生质体的方法。本方法是：①在做实验的前5天时，对结缕草进行霍格兰喷施；②在做实验的前2天改用蒸馏水喷施；③在进行试验的前30分钟，喷蒸馏水，覆上保鲜膜；④剪取带有茎的幼嫩叶片，放入装有蒸馏水的烧杯中；⑤用干净滤纸吸取叶片上的水；⑥将结缕草叶片切割成细条；⑦健康的原生质体应是圆形的并没有其他细胞。相比使用愈伤组织提取原生质体的方法，采用叶片制备原生质体明显了提高实验效率，并简化了实验步骤，节约大量时间及人力，不需要专门进行愈伤组织培养。
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公开(公告)号：CN106561449A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610896207.0
申请日：2016-10-14
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法，属于生物技术领域。本方法包括下列步骤：①外植体选取与消毒；②改良培养基的配备；③愈伤诱导；④愈伤继代；⑤芽分化；⑥生根培养；⑦炼苗与移栽。对MS培养基进行改良，配方为：在基础的MS培养基中加入pvp40和酸水解酪蛋白，其他组分均无变化；pvp‑40的浓度为0.1‑1mg/L，酸水解酪蛋白浓度为0.15‑0.5mg/L。利用本发明所述的培养基配方和利用种子作为外植体，首次建立了结缕草Compadre组织培养体系；从种子诱导愈伤到获得体外植株，总周期为135天；以此为利用遗传转化技术来解决结缕草绿期短的问题奠定了基础，更好地推动了运动场草坪事业的发展。
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公开(公告)号：CN105918123A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610286951.9
申请日：2016-05-03
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，包括如下步骤：1)愈伤组织的诱导：将外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；2)愈伤组织的分化：将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种到后期分化培养基中，至分化出芽；3)生根培养：将所述芽接种到生根培养基中进行生根培养，得苜蓿幼苗。本发明所述的方法，通过对外植体和培养基的优化选择，进一步结合适宜的培养条件和操作方法，可实现保定苜蓿的高效再生。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104885938A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510271876.4
申请日：2015-05-25
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明具体提供一种快速获得日本结缕草组培苗的方法，包括如下步骤：1)灭菌种子浸种3天；2)浸种后的种子吹干，以水培养至萌发出1-2mm的芽；3)萌芽后的种子接种到固体MS培养基上，培养至幼苗地上部高3cm，此时幼苗叶鞘底部出现表面粗糙的节点；4)剥去种皮，去除节点上方的茎叶，将余下的植株以ZJ-SM培养基培养至茎端长出芽；5)去除茎端长出的芽，放回ZJ-SM培养基上继续培养至根端长出芽；6)将根端长出的芽切下放到固体1/2MS培养基上培养至长出根，得到完整的植株；7)将完整的植株炼苗后移植，得到组培苗。相比于愈伤组织再生体系的方法，本发明将4个月缩到了50天，大大缩短了日本结缕草的繁殖周期。
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公开(公告)号：CN106561449B
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201610896207.0
申请日：2016-10-14
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法，属于生物技术领域。本方法包括下列步骤：①外植体选取与消毒；②改良培养基的配备；③愈伤诱导；④愈伤继代；⑤芽分化；⑥生根培养；⑦炼苗与移栽。对MS培养基进行改良，配方为：在基础的MS培养基中加入pvp40和酸水解酪蛋白，其他组分均无变化；pvp‑40的浓度为0.1‑1mg/L，酸水解酪蛋白浓度为0.15‑0.5mg/L。利用本发明所述的培养基配方和利用种子作为外植体，首次建立了结缕草Compadre组织培养体系；从种子诱导愈伤到获得体外植株，总周期为135天；以此为利用遗传转化技术来解决结缕草绿期短的问题奠定了基础，更好地推动了运动场草坪事业的发展。
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公开(公告)号：CN105918123B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201610286951.9
申请日：2016-05-03
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，包括如下步骤：1)愈伤组织的诱导：将外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；2)愈伤组织的分化：将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种到后期分化培养基中，至分化出芽；3)生根培养：将所述芽接种到生根培养基中进行生根培养，得苜蓿幼苗。本发明所述的方法，通过对外植体和培养基的优化选择，进一步结合适宜的培养条件和操作方法，可实现保定苜蓿的高效再生。
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公开(公告)号：CN107043736A
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201710465517.1
申请日：2017-06-19
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种直接使用结缕草叶片制备原生质体的方法，涉及制备原生质体的方法。本方法是：①在做实验的前5天时，对结缕草进行霍格兰喷施；②在做实验的前2天改用蒸馏水喷施；③在进行试验的前30分钟，喷蒸馏水，覆上保鲜膜；④剪取带有茎的幼嫩叶片，放入装有蒸馏水的烧杯中；⑤用干净滤纸吸取叶片上的水；⑥将结缕草叶片切割成细条；⑦健康的原生质体应是圆形的并没有其他细胞。相比使用愈伤组织提取原生质体的方法，采用叶片制备原生质体明显了提高实验效率，并简化了实验步骤，节约大量时间及人力，不需要专门进行愈伤组织培养。
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公开(公告)号：CN104885938B
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201510271876.4
申请日：2015-05-25
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明具体提供一种快速获得日本结缕草组培苗的方法，包括如下步骤：1)灭菌种子浸种3天；2)浸种后的种子吹干，以水培养至萌发出1‑2mm的芽；3)萌芽后的种子接种到固体MS培养基上，培养至幼苗地上部高3cm，此时幼苗叶鞘底部出现表面粗糙的节点；4)剥去种皮，去除节点上方的茎叶，将余下的植株以ZJ‑SM培养基培养至茎端长出芽；5)去除茎端长出的芽，放回ZJ‑SM培养基上继续培养至根端长出芽；6)将根端长出的芽切下放到固体1/2MS培养基上培养至长出根，得到完整的植株；7)将完整的植株炼苗后移植，得到组培苗。相比于愈伤组织再生体系的方法，本发明将4个月缩到了50天，大大缩短了日本结缕草的繁殖周期。
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