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公开(公告)号：CN1475574A
公开(公告)日：2004-02-18
申请号：CN02128820.8
申请日：2002-08-14
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种用微弹轰击对兰花进行基因转化的方法，以达到高效、稳定、简便地转化兰花基因的目的。本发明的技术方案是：用携带外源基因片段的质粒载体与金粉混合制成的子弹，对兰花愈伤组织进行轰击，将供体的外源基因片段转移到受体基因组中。为了提高转化效率，将所述兰花愈伤组织在高渗培养基上预处理后再进行轰击。所述高渗培养基优选的为含0.4M甘露醇的高渗培养基，预处理时间为1小时。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料，通过微弹轰击实现兰花基因的转化，既避免了嵌合体的产生，又易于操作，转化效率达到14％以上。利用本发明的方法可以获得稀有花色、多花大花、花期提前或延长的花卉，实现兰花育种及生产的产业化。
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公开(公告)号：CN1220778C
公开(公告)日：2005-09-28
申请号：CN02128820.8
申请日：2002-08-14
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种用微弹轰击对兰花进行基因转化的方法，以达到高效、稳定、简便地转化兰花基因的目的。本发明的技术方案是：将携带外源基因片段的质粒载体与直径为1μm的金粉混合制成子弹，对兰花愈伤组织进行轰击，将供体的外源基因片段转移到受体基因组中；所述轰击采用基因枪在1100psi的压力下进行，子弹飞行距离为5.5-6.5厘米，真空度为24-28毫米汞柱。所述高渗培养基优选的为含0.4M甘露醇的高渗培养基，预处理时间为1小时。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料，通过微弹轰击实现兰花基因的转化，即避免了嵌合体的产生，又易于操作，转化效率达到14%以上。利用本发明的方法可以获得稀有花色、多花大花、花期提前或延长的花卉，实现兰花育种及生产的产业化。
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公开(公告)号：CN1220771C
公开(公告)日：2005-09-28
申请号：CN02128819.4
申请日：2002-08-14
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法，以达到高效、稳定、简便地对兰花进行遗传转化的目的。本发明的技术方案是：1)将兰花Dendrobiumnobile的愈伤组织与携带外源基因片段的农杆菌共培养；2)共培养后的愈伤组织转入含有30mg/L潮霉素的筛选培养基上培养；3)将得到的抗性愈伤组织转接入分化培养基，诱导出苗和生根，得到转基因兰花植株。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料，通过农杆菌介导实现兰花的基因转化，即避免了嵌合体的产生，又易于操作，转化效率达到20%以上。为利用转基因技术来改善兰花品质，获得抗病、抗逆、提前开花、花色、花型改变的兰花新品种奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN1475563A
公开(公告)日：2004-02-18
申请号：CN02128819.4
申请日：2002-08-14
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法，以达到高效、稳定、简便地对兰花进行遗传转化的目的。本发明的技术方案是：将兰花愈伤组织与携带外源基因片段的农杆菌共培养，将供体的外源基因片段转移到受体基因组中。所述农杆菌应先在液体LB培养基中，28℃振荡培养至对数生长期，然后涂布于固体AB培养基上培养2－3天后刮下收集到无菌水中，兰花愈伤组织在其中浸泡半个小时后，接入共培养培养基共培养。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料，通过农杆菌介导实现兰花的基因转化，即避免了嵌合体的产生，又易于操作，转化效率达到20％以上。为利用转基因技术来改善兰花品质，获得抗病、抗逆、提前开花、花色、花型改变的兰花新品种奠定了良好的基础。
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