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公开(公告)号：CN101792738B
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN200910194842.4
申请日：2009-08-31
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种环丙沙星单克隆抗体细胞株及其单克隆抗体，所得到的单克隆抗体可用于制备环丙沙星的快速检测酶联免疫(ELISA)试剂盒，实现在水产品中快速检测残留的环丙沙星。在本发明中，首先采用了碳二亚胺一步法，制备了免疫原——环丙沙星与牛血清白蛋白的偶联物(CIP-BSA)，及包被原——环丙沙星与鸡卵血清白蛋白的偶联物(CIP-OVA)。用CIP-BSA免疫Balb/c小鼠，将免疫后的Balb/c小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法对阳性克隆进行筛选，经过多次的亚克隆，获得了稳定分泌的针对环丙沙星的单克隆抗体细胞株；采用动物体内诱生法制备腹水，腹水经纯化后得到单克隆抗体。
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公开(公告)号：CN101759799A
公开(公告)日：2010-06-30
申请号：CN200810207693.6
申请日：2008-12-25
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C07K14/765 , G01N33/53
Abstract: 一种氯霉素免疫原的制备方法。其特征在于包括下列主要步骤：将牛血清蛋白、氯霉素琥珀酸钠、碳二亚胺，以摩尔比1∶50∶1200分别溶解在磷酸盐缓冲液中，然后将三种溶液混合，在室温下反应2小时，期间缓慢摇动使溶液充分反应；将反应后的液体装入透析袋内，再放入1L磷酸缓冲液中透析48小时，每8小时换液一次；收集透析袋内的液体，在-20℃预冷冻2小时，然后在-50℃下冷冻干燥，得到氯霉素免疫原的白色固体粉末。本发明的氯霉素免疫原的制备方法不但能有效地制得氯霉素免疫原，而且，操作过程简单，生产效率高。为提高氯霉素药物残留酶联免疫检测方法的准确度和灵敏度奠定了坚实的基础。并且，还有利于普及推广应用。
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公开(公告)号：CN101710124A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910200078.7
申请日：2009-12-08
Applicant: 上海海洋大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/531 , C07K14/765 , C07K1/113
Abstract: 本发明公开了一种检测水产品中环丙沙星残留的酶联免疫试剂盒，该试剂盒主要包括：包被有环丙沙星-鸡卵血清白蛋白偶联物(CIP-OVA)的酶标板、环丙沙星单克隆抗体、环丙沙星(CIP)标准品溶液、酶标二抗、底物显色液、洗液、终止液。本发明还公开了一种利用上述试剂盒检测水产品中环丙沙星残留的方法，它包括以下步骤：首先对样品进行前处理，然后利用试剂盒检测，最后分析实验结果。本发明提供的试剂盒操作简便、灵敏度高、特异性强，适合大规模的样品检测。
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公开(公告)号：CN101792738A
公开(公告)日：2010-08-04
申请号：CN200910194842.4
申请日：2009-08-31
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种环丙沙星单克隆抗体细胞株及其单克隆抗体，所得到的单克隆抗体可用于制备环丙沙星的快速检测酶联免疫(ELISA)试剂盒，实现在水产品中快速检测残留的环丙沙星。在本发明中，首先采用了碳二亚胺一步法，制备了免疫原——环丙沙星与牛血清白蛋白的偶联物(CIP-BSA)，及包被原——环丙沙星与鸡卵血清白蛋白的偶联物(CIP-OVA)。用CIP-BSA免疫Balb/c小鼠，将免疫后的Balb/c小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法对阳性克隆进行筛选，经过多次的亚克隆，获得了稳定分泌的针对环丙沙星的单克隆抗体细胞株；采用动物体内诱生法制备腹水，腹水经纯化后得到单克隆抗体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101744771A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200810204719.1
申请日：2008-12-17
Applicant: 上海海洋大学
IPC: A61K9/14 , A61K31/496 , A61K47/36 , A61P31/04
Abstract: 一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法。特征是该方法为：先以蒸馏水配制成浓度为1％的冰醋酸水溶液，在磁力搅拌的条件下，再加入壳聚糖，使其溶解，得壳聚糖浓度为1.5-2.5mg/mL的壳聚糖溶液；接着将恩诺沙星原料药加入上述壳聚糖溶液中，并保持磁力搅拌10分钟使其分散均匀，后调节pH至5.0，得到恩诺沙星壳聚糖溶液；再接着将三聚磷酸钠溶于蒸馏水中，配制成浓度为1.2-1.8mg/mL的三聚磷酸钠溶液，且将其缓慢滴入磁力搅拌状态下的上述恩诺沙星壳聚糖溶液中，滴加完成后继续磁力搅拌1小时固定，得恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液；最后将上述固定化的恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液分装于冷冻瓶中，在-70℃下预冷冻2小时，然后在-50℃下抽真空冷冻干燥，制成固体恩诺沙星纳米粒。
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公开(公告)号：CN101710123A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910200072.X
申请日：2009-12-08
Applicant: 上海海洋大学
IPC: G01N33/577 , C07K16/44 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了一种检测环丙沙星胶体金层析试纸，包括硝酸纤维素膜、样品垫、胶体金结合垫、吸水垫和PVC背衬。在本发明中，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液并利用其标记环丙沙星单克隆，同时在硝酸纤维素膜上包被环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物及羊抗鼠IgG抗体，分别构成检测区(T)和质控区(C)。当待测样品中含有环丙沙星时能够使检测区颜色发生变化，从而通过肉眼判定结果。本发明提供的胶体金层析试纸灵敏度高、检测迅速、价格低廉，可以用于现场检测水产品中环丙沙星的残留。
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公开(公告)号：CN101948531A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010260392.7
申请日：2010-08-23
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C07K14/765 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种用于孔雀石绿检测的完全抗原及其制备方法。本发明首次利用孔雀石绿的结构类似物副品红，进行了用于孔雀石绿检测的完全抗原的合成。免疫原是由副品红和牛血清蛋白在室温条件下，通过碳二亚胺法进行偶联反应，用磷酸缓冲液(pH为7.4，浓度为0.01mol/L)透析后，经过冷冻干燥获得的。研究表明，该方法不仅成功地合成了可用于制备检测孔雀石绿特异抗体的免疫原，同时采用了新的偶联方法、缩短了制备时间，提高了偶联比率。本发明为开发孔雀石绿药物残留酶联免疫检测方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN201743795U
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201020502425.X
申请日：2010-08-23
Applicant: 上海海洋大学
IPC: A61D3/00
Abstract: 一种用于小鼠静脉免疫和取血的简易装置。它包括离心管，其特征是所述的离心管的前端顶部处与离心管的管口处之间设有一条状的开口，所述的离心管安置在一底座上，所述的底座的上端面的中部处设有一纵向的凹槽且前端为呈锥形状，所述的底座的底面中部处设有一横向的尼龙扣带，所述的离心管嵌装在所述的底座上端面中部处的纵向的且前端为呈锥形状的凹槽内处并相互配合，并通过装设在底座底面中部处的横向的尼龙扣带形成固定联接。本实用新型的简易装置方便于对小鼠进行尾部静脉免疫和静脉取血，避免了以往对小鼠取血而导致的意外伤亡，并有利于实验开展的可持续性，且结构简单，操作方便。本实用新型适宜于小鼠静脉免疫和静脉取血实验用。
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