一种生产木二糖的方法及其专用固定化酶
摘要:
本发明公开了一种制备木二糖的方法及其专用固定化酶。本发明的固定化木聚糖酶按照包括如下步骤的方法制备:1)用金属螯合环氧载体Eupergit C 250L固定重组木聚糖酶XynB,得到固定化酶;2)将步骤1)得到的固定化酶悬浮于0.5-1.25M、pH为5.5-8.0磷酸盐缓冲液中,20-35℃反应12-60小时,得到固定化木聚糖酶;所述重组木聚糖酶XynB是将核苷酸序列是序列表中序列1的DNA序列的木聚糖酶基因经大肠杆菌表达得到的木聚糖酶。该固定化木聚糖酶的酶活力回收较高,稳定性和装柱后连续操作性能优良,便于连续化生产,且产物组成稳定易于控制;利用该固定化木聚糖酶生产木二糖,水解操作简单,可节约酶的用量,还可实现酶与水解液的分离,大幅度降低生产成本并提高生产效率。因此,该方法是一种适宜工业化生产木二糖的方法。
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