本申请公开了一种重组禽流感五价疫苗及其制备方法与应用，属于兽用制品领域。本申请所要解决的技术问题是如何同时预防多种禽流感病毒。为了解决上述技术问题，本申请提供了用于预防和/或治疗流感病毒感染的组合物，所述组合物包括氨基酸序列是SEQ ID No.2‑8的蛋白质。本申请还提供编码上述蛋白质的核酸分子、含有上述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物和/或重组细胞。本申请还提供上述的蛋白质在制备预防流感病毒感染的产品中的应用。本申请提供的蛋白质可在转染了重组载体FastBac DuaH5H9H7H3五价HA载体的SF9细胞中表达。抗原与佐剂混合免疫动物后可以起到保护动物效果，且对动物安全。